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第一部分 KM—5000D微型角膜刀制作超薄角膜瓣的实验研究 目的 研发KM—5000D微型角膜刀制作超薄角膜瓣的技术。方法 设计制作超薄角膜瓣的KM—5000D微型角膜刀成形系统。对新鲜离体猪眼80眼、离体人眼10眼和在体兔眼12眼进行超薄角膜瓣的制作,观察运刀情况,角膜瓣厚度、直径以及瓣异常的发生率;取离体人眼角膜瓣标本在光镜和扫描电镜下观察切面和边缘形态。结果 制作带蒂超薄角膜瓣的自动旋转型KM-5000D微型角膜刀成形系统包括微型切割器、双电机动力装置和控制箱部件。新鲜离体猪眼、离体人口艮和在体兔眼的实验中,负压保持眼压稳定在65mmHg。离体猪眼角膜瓣厚度和直径分别为87.85±4.64 μm和8.8±0.42mm,瓣异常发生率18.75%。离体人眼角膜瓣厚度和直径分别为86.4±5.13μm和7.5±0.55mm,瓣异常发生率20%。在体兔角膜瓣厚度和直径分别为62.08±3.70 μm和7.96±0.30mm,瓣异常发生率16.67%。离体猪眼、离体人眼和在体兔眼的运刀顺畅比率分别为88.75%,80.0%和83.33%。离体人眼角膜瓣光镜检查显示其保持了角膜上皮、前弹力层和前部少许基质,扫描电镜检测显示切面光滑度和边缘整齐性良好。结论 KM—5000D微型角膜刀制作超薄角膜瓣安全有效,预测性、稳定性良好。可应用于超薄角膜瓣LASIK手术的临床研究。 第二部分 超薄角膜瓣LASIK和LASEK对兔角膜组织愈合的影响 目的 探讨超薄角膜瓣LASIK和LASEK手术对兔角膜组织愈合的影响。方法 对32只新西兰白兔随机分为两组各16只,一组右眼施行超薄角膜瓣LASIK手术,另一组右眼施行LASEK手术,左眼作对照。两组兔术眼均行-10D准分子激光切削。术后裂隙灯显微镜观察角膜情况,术后1、3个月取两组兔激光切削区角膜分别进行光镜、透射电镜检查,并采用免疫组化和RT-PCR的方法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连结蛋白及转化生长因子β 1在其中的表达水平。结果 超薄角膜瓣LASIK组术后角膜愈合反应轻、恢复快,角膜保持透明,无haze发生。LASEK组术后角膜愈合反应重,恢复慢,1个月时角膜发生1级haze(62.5%)和2级haze(37.5%),3个月时发生0.5级haze(43.75%)和1级haze(56.25%)。术后1、3个月超薄角膜瓣LASIK组和LASEK组角膜前基质内都有Ⅲ型胶原、FN和TGF β1蛋白及其mRNA的表达,但LASEK组的表达明显增强(P<0.05);二组间Ⅰ型胶原蛋白及其mRNA的表达无明显差异(P>0.05)。超薄角膜瓣LASIK组术后3个月Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、FN、TGF-β 1 mRNA的表达与正常对照差异无显著性(P>0.05)。结论 动