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目的 探讨己烯雌酚对青春期大鼠睾丸结构与精子发生的影响;观察生精细胞中雌激素受体表达的变化,分析己烯雌酚对青春期大鼠生殖系统损伤的可能作用机制,认识青春期大鼠长期接触外源性雌激素对成年后生育力造成的影响。进而了解环境雌激素污染导致的男性生殖系统损伤,为男性不育病因提供参考资料。 材料与方法 1.急性染毒实验 选取青春期6周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,分笼饲养于实验房。随机分成4组,每组6只。实验药剂:己烯雌酚。将己烯雌酚溶解于玉米油中,分别注射含DES 0μg/kg·day(A组),2μg/kg·day(B组),10μg/kg·day(C组),50μg/kg·day(D组)的玉米油0.3ml。各染毒组隔日腹腔注射,28天后采集标本。 2.恢复性实验 动物选取、给药剂量、给药时间与急性实验的相同。在持续给药28天后停药,继续饲养60天后取材。对照组0μg/kg·day(E组),低剂量组2μg/kg·day(F组),中剂量组10μg/kg·day(G组),高剂量组50μg/kg·day(H组)。 3.慢性染毒实验 选取青春期6周龄雄性SD大鼠,分笼饲养于实验房。随机分成4个组,每组6只。将己烯雌酚溶解于水中,分别饮用含己烯雌酚0μg/kg·day(I组),0.02μg/kg·day(J组),0.2~g/kg·day(K组),2μg/kg·day(L组)的蒸馏水,连续给药两个生精周期(96天)后取材。 4.检测睾丸和附睾重量变化,睾丸每日精子生成量以及附睾尾精子储存量的变化。应用光镜和透射电镜观察睾丸组织结构的变化。应用免疫组化方法检测睾