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目的: 研究慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染的不同阶段患者血清25-羟维生素D3(25-hydroxyvitamin D3，25(OH)D3)和羟化酶(isoenzymes ofCytochrome P450，CYP) CYP2R1、CYP27A1、CYP24A1的含量情况，慢性HBV感染的不同阶段包括乙肝携带者（慢性HBV携带状态和非活动性乙肝表面抗原携带状态）、慢性乙型肝炎、代偿期肝硬化、失代偿期肝硬化和肝细胞癌。将慢性HBV感染者存在羟化酶代谢紊乱作为导致25(OH)D3缺乏的假设，探寻25(OH)D3缺乏的发生机制。 方法: 横断面研究。收集2012年8月1日至2013年4月30日首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心收治的乙肝表面抗原（Hepatitis B surface antigen，HBsAg）阳性患者（1278例）常规检查之后的残余血清，以及2013年1月1日至4月30日于北京友谊医院体检中心健康检查的体检者残余血清（408例），共计1686例，避光保存于-80℃。回顾性查阅患者的病例资料，根据《排除标准》剔除956例血清，最终有730例标本纳入研究。共分为6组，包括健康者328例、乙肝携带者75例、慢性乙型肝炎患者142例、代偿期肝硬化患者66例、失代偿期肝硬化患者59例、肝细胞癌患者60例。首先，对全部标本进行25(OH)D3含量检测，使用高效液相色谱/质谱联用技术，仪器为Transcend高效液相色谱系统（Transcend，ThermoFisher Scientific，Pennsylvania，USA）和API3000串联四级杆质谱仪(Applied Biosystems/MDS Sciex，USA)，色谱柱为Agilent ZORBAXSB-C18，孔径3.5μm(Agilent，HP，California，USA)。随后，采用酶联免疫吸附试验方法检测3种羟化酶含量，分别为肝细胞微粒体内的25-羟化酶(CYP2R1)、肝细胞线粒体内的25-羟化酶(CYP27A1)、肾小管上皮细胞内的24-羟化酶(CYP24A1)。为了降低羟化酶因25(OH)D3离散程度较大带来的影响，稳定羟化酶各组的25(OH)D3检测值处于均值附近，因此在每组中挑选25(OH)D3检测值位于(x)±2s范围内的血清，并保证每组间的性别构成及样本例数匹配，最终共136例纳入研究，其中包括健康者14例、乙肝携带者14例、慢性乙型肝炎患者27例、代偿期肝硬化患者27例、失代偿期肝硬化患者28例、肝细胞癌患者26例。 结果: (1)、各组慢性HBV感染者的血清25(OH)D3含量均低于健康者（7.08±4.11 vs8.22±1.33 ng/mL，P＜0.05）。其中，乙肝病毒携带者血清25(OH)D3含量稍低于健康者，差异无统计学意义（8.15±4.47 vs8.22±1.33 ng/mL，P＞0.05），随着肝病进展，25(OH)D3呈现逐渐降低的趋势，失代偿期肝硬化最低。但是，只有代偿期肝硬化和失代偿期肝硬化与健康者相比，差异有统计学意义。肝细胞癌患者血清25(OH)D3含量稍低于慢性乙型肝炎，明显高于代偿期肝硬化，远远高于失代偿期肝硬化（7.75±4.34 vs4.33±3.11 ng/mL，P＜0.05）。 (2)、在常用的生化指标中，慢性HBV感染者血清25(OH)D3含量与总胆固醇呈正相关(r=0.264，P＜0.05)，与总胆红素呈负相关(r=-0.229，P＜0.05)，与白蛋白ALB呈正相关(r=0.383，P＜0.05)，与谷草转氨酶AST呈负相关(r=-0.118，P＜0.05)，但是，与ALT无相关性(r=0.034，P＞0.05)。 (3)、健康对照组25(OH)D3的95％参考范围及不同缺乏程度如下:正常水平5.61-10.83 ng/mL、轻度缺乏4-5.61 ng/mL、中度缺乏2-4 ng/mL、重度缺乏≦2ng/mL。健康者中81.7％处于正常水平，并且不存在重度缺乏，随着肝病的进展:25(OH)D3正常水平所占的比例逐渐减少，失代偿期肝硬化最低;轻-中度缺乏的比例逐渐升高，失代偿期肝硬化最高;重度缺乏首先出现在慢性乙型肝炎，失代偿期肝硬化最高。 (4)、与健康者相比，3种羟化酶含量在慢性HBV感染者中出现整体升高。随着肝病的进展:CYP2R1逐渐升高，CYP27A1逐渐降低，CYP24A1逐渐升高。 (5)、慢性HBV感染者的血清25(OH)D3与CYP2R1呈负相关(r=-0.208，P＜0.05)，与CYP27A1呈正相关(r=0.201，P＜0.05)，与CYP24A1呈负相关（r=-0.266，P＜0.05）。血清CYP27A1有随着CYP2R1增加而增加的趋势，但二者的相关性无统计学意义，CYP27A1与CYP24A1无相关性，血清CYP2R1与CYP24A1呈正相关(r=0.295，P＜0.05)。 结论: 慢性HBV感染者存在不同程度的25(OH)D3缺乏，血清25(OH)D3含量随肝病进展而逐渐降低，失代偿期肝硬化最低。血清25(OH)D3降低可能与维生素D3前体的合成原料（总胆固醇）不足、黄疸影响维生素D3前体在皮肤中的合成、肝细胞合成维生素D3结合蛋白的能力下降、维生素D3受体表达减少、线粒体损伤、羟化酶紊乱等因素有关。慢性HBV感染者体内存在羟化酶代谢紊乱(CYP2R1、CYP27A1、CYP24A1)，表现为羟化酶含量整体升高。羟化酶代谢紊乱是慢性HBV感染者25(OH)D3缺乏的主要发病机制之一。