胆汁外引流对失血性休克时多器官功能的保护作用及机制研究

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目的:探讨胆汁外引流对失血性休克时肠屏障功能的影响;胆汁外引流对肝脏中血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响;胆汁外引流对失血性休克时多器官功能的保护作用与HO-1的关系。方法:运用酶联免疫吸附实验、实时反转录-聚合酶链反应、蛋白免疫印迹、免疫组织化学染色、组织病理评分等多种技术方法从功能学、形态学、分子生物学的角度综合研究多器官功能的变化及其机制。首先,通过股静脉置管放血法建立失血性休克大鼠模型,通过留置胆总管导管进行胆汁外引流,研究失血性休克胆汁外引流后肠屏障功能的改变。其次,通过留置胆总管导管进行胆汁外引流,研究胆汁外引流后肝脏中HO-1表达的变化。最后,在造模前24小时部分大鼠给予HO-1特异性抑制剂锌原卟啉,检测失血性休克胆汁外引流后多器官功能改善与HO-1的关系。结果:失血性休克时,胆汁外引流后6小时血浆中D乳酸及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)水平显著下降(P<0.05);胆汁外引流后4小时、6小时回肠中紧密连接蛋白occludin的表达显著升高(P<0.05);胆汁外引流后6小时回肠中紧密连接蛋白claudin-1的表达显著升高(P<0.05);胆汁外引流后2小时、4小时、6小时回肠上皮细胞坏死脱落现象明显减轻,回肠组织病理评分明显下降(P<0.05)。胆汁外引流后1小时、6小时肝脏中HO-1的表达明显升高(P<0.05)。失血性休克时,胆汁外引流后大鼠空肠中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)mRNA水平显著下降(P<0.05);胆汁外引流后大鼠空肠、回肠中紧密连接蛋白occludin及水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)水平显著升高(P<0.05);胆汁外引流后大鼠肺脏和肾脏的干/湿比显著增加(P<0.05);胆汁外引流后大鼠肺脏和肾脏中髓过氧化物酶水平显著下降(P<0.05);胆汁外引流后大鼠肺脏和肾脏中TNF-αmRNA水平显著下降(P<0.05);胆汁外引流后大鼠肺脏、肾脏中水通道蛋白AQP-1水平显著升高(P<0.05)。运用锌原卟啉抑制HO-1后,胆汁外引流后的以上多器官功能改善效应均消失(P<0.05)。结论:胆汁外引流减轻失血性休克时肠屏障功能损伤,导致肝脏中HO-1表达增加。胆汁外引流通过诱导HO-1升高减轻失血性休克时多器官功能损伤。
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