转基因育种是常规育种的重要辅助手段,但人们担心标记基因的食品安全问题,因此,建立柑橘无选择标记的转化体系,对提高转基因作物的安全性意义重大。柑橘溃疡病是一种世界性的检疫性病害,对产业危害极大,因缺乏抗病资源和有效防控方法,该病仍无法根除。通过转基因育种,抑制病原菌致病因子的功能,获得抗病种质,是一种创新,为彻底控制溃疡病打下基础。本研究的结果如下：1.通过将pX6-gfp中的启动子G10-90替换成CaMV35S,构建了p35S-gfp载体,并通过农杆菌介导法转化实生态甜橙,诱导了gfp的表达,证实此载体能在柑橘中成功发生重组,获得无标记的转基因植株。同时,建立了一套完善的甜橙无标记转基因体系；2.通过农杆菌介导法对冰糖橙导入pthA-NLS基因,经PCR检测,获得了6株转基因株系。利用RT-PCR分析外源基因在转基因植株中的表达,初步表明外源基因pthA-NLS已成功转入到冰糖甜橙基因组中,并能正常表达。3.将ScFv基因克隆到植物表达载体PBI121的Xba I和Sma I中,利用农杆菌介导法转化甜橙实生苗节间茎段,经PCR检测,获得了12株转ScFv基因甜橙,转基因甜橙温室生长。利用RT-PCR分析外源基因ScFv在转基因植株中的表达,初步表明外源基因ScFv已成功转入到大红甜橙基因组中,并能正常表达。采用离体接种对部分转ScFv基因植株进行抗性筛选,结果表明,转基因植株对溃疡病表现出一定的抗性,株系之间抗性存在着差异,其中D9可能是很有希望的抗性材料。