松材线虫是我国林业病害上最严重的植物病原物之一。松材线虫侵染植物后，可以以松树内生真菌——蓝变菌作为食物来源，真菌成为了松材线虫在林间的种群繁殖和病害流行的一个重要环节。灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）也是当前松材线虫培养的食物来源。研究真菌与线虫的互作关系，构建真菌转基因的工具载体，可以为松材线虫的流行规律研究和防治提供理论基础，同时也为真菌转基因体系奠定基础。本研究采用pCAMBIA1300载体作为基本载体，通过对它的改造使之成为适用于真菌转基因的载体。首先我们以油菜菌核菌基因组DNA为模板，克隆得到两个启动子活性片段acp和gpd片段；然后分别从pCAMBIA1300质粒、pEGFP-N1质粒中克隆获得潮霉素抗性筛选基因hph片段和绿色荧光蛋白基因gfp片段；再通过重叠延伸PCR技术将acp片段和hph片段、gpd片段和gfp片段分别两两连接，并在体外将两个大片段连接起来；最后将这个大片段连接到1300质粒上，获得真菌转基因载体pCAGG-N1。将获得的转基因载体利用农杆菌介导的转化方法转化灰葡萄孢菌（Botrytiscinerea），获得转GFP的灰葡萄孢真菌。本论文通过克隆强活性的启动子片段构建出一种能广泛应用于真菌转基因的载体，实现了在灰葡萄孢菌中的异源表达，为以后研究真菌与线虫互作，转基因真菌防治松材线虫等研究提供了一个便利的技术体系。