【摘 要】
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猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是猪流行性腹泻病(Porcine epidemic diarrhea,PED)的病原体,自2010年在我国爆发以来,给养猪业造成重大经济损失。
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猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是猪流行性腹泻病(Porcine epidemic diarrhea,PED)的病原体,自2010年在我国爆发以来,给养猪业造成重大经济损失。目前国内普遍使用经典毒株CV777的灭活疫苗及其弱毒活疫苗经后海穴免疫接种,但免疫保护效果并不理想,推测可能的原因有:流行毒株的S蛋白发生变异;PEDV经肠道感染,黏膜免疫起主要作用,而后海穴接种无法有效激发黏膜免疫。本研究首先测定了2016年上海流行株的全基因组序列,与CV777相比,该毒株S蛋白上的中和表位COE和S1D发生氨基酸突变。单增李斯特菌可经肠上皮细胞感染猪等多种动物,诱导肠道粘膜免疫。以减毒单增李斯特菌表达融合蛋白S1D-EGFP,共聚焦证实蛋白表达成功,免疫印迹证实口服和静脉接种活载体疫苗可诱导小鼠产生特异性血清IgG。为便于猪体接种后的血清IgG检测,利用大肠杆菌分别表达制备的COE和S1D为包被抗原,建立了与活载体疫苗相配套的抗体间接ELISA方法,灵敏度高,该方法检测临床血清样品的结果与市售试剂盒检测结果一致性高。
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