利用iTRAQ探索脓毒症诊断及预后评估的新型生物学标记物的临床价值

来源 :中国人民解放军医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jsxhshh123456
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目的:本实验旨在筛选并验证血清和尿液中具有相关性的可对脓毒症进行早期诊断、病情严重程度及其预后评估的新型生物标记物。方法:收集2012年3月至2013年5月在中国人民解放军总医院呼吸科监护病房(RICU)、急诊科监护病房(EICU)和外科重症监护病房(SICU)的住院、满足脓毒症诊断标准两项或两项以上条件患者的血标本。应用iTRAQ联合LC-MS技术检测,其中SIRS患者10例,脓毒症生存患者10例,脓毒症死亡患者10例,对血清和尿液进行蛋白提取及核素标记、质谱检测,筛选候选差异蛋白,并进行生物信息学分析,进一步筛选具有临床价值的候选差异表达蛋白。采用ELISA双抗夹心法分别检测131例脓毒症患者和25例SIRS患者血清和尿液候选蛋白。记录标本收集对应时间患者的生命体征、CRP、PCT、血常规、血生化、凝血功能及动脉血气分析等资料。结果:用iTRAQ定量蛋白质组学技术最终筛选出血尿一致性表达的候选差异蛋白为α-1-酸性糖蛋白(AGP)和维生素D结合蛋白(VDBP)。在ELISA验证中,血清中的AGP水平在脓毒症中明显高于SIRS组,优于CRP和PCT,且在脓毒症亚组间差异具有显著统计学意义。尿液中AGP在脓毒症诊断及病情严重程度评估均无明显价值(p>0.05)。血清和尿液VDBP水平在脓毒症和SIRS患者差异均无统计学意义,但是随着病情加重,血清VDBP浓度逐渐降低,具有统计学意义。且血清VDBP可预测脓毒症患者的转归。结论:本实验首次将定量蛋白质组学技术应用脓毒症患者血清和尿液标记物的筛选。我们发现,血清AGP可以有效地鉴别SIRS和脓毒症患者及评估脓毒症不同病情严重程度,血清VDBP可以对脓毒症患者的病情严重程度及预后进行客观评估。
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