【摘 要】
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毛竹(Phyllostachys heterocycla(Carr.)Mitford cv.Pubescens)是最为广泛种植的竹子,占所有竹类种植面积的70%左右。在条件适宜时,毛竹笋最快可以在一天内伸长1米,历时45-60天就可达到最终5-20米的高度。因其速生、高产的特征,成为中国东南地区最重要的非木质森林资源,具有极高的生态和经济价值。通过基因组、转录组及蛋白质组数据分析了影响毛竹速生的可
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毛竹(Phyllostachys heterocycla(Carr.)Mitford cv.Pubescens)是最为广泛种植的竹子,占所有竹类种植面积的70%左右。在条件适宜时,毛竹笋最快可以在一天内伸长1米,历时45-60天就可达到最终5-20米的高度。因其速生、高产的特征,成为中国东南地区最重要的非木质森林资源,具有极高的生态和经济价值。通过基因组、转录组及蛋白质组数据分析了影响毛竹速生的可能因素,但具体分子机制至今知之甚少。植物发育依赖于众多激素和环境信号的协调调节,其中油菜素内酯(Brassinosteroids,BRs)是促进植物生长的一种甾醇类激素,在植物生长发育过程中发挥着重要的作用。本课题组在关于BR对毛竹生长影响的研究中发现,PPZ(BR合成抑制剂丙环唑)处理后的毛竹幼苗呈现出节间变短,叶夹角变小等表型。RNA-seq芯片数据分析比对发现许多参与BR信号通路的基因在PPZ处理后出现明显变化,其中PH01000519G0840和PH01000068G1560呈现明显下调趋势。经BLAST及多序列比对分析,认为这两个基因为PRE的同源基因。生物信息分析最终确定毛竹中有4个PRE的同源基因PH01000960G0260,PH01000519G0840,PH01000068G1560 和 PH01000065G2010,并分别命名为PePRE1/2/3/4,PePREs具有高度保守的螺旋-环-螺旋结构(Helix-Loop-Helix)。对毛竹幼苗及毛竹笋的不同组织进行PePREs基因表达量测定,结果显示PePRE1和PePRE3在各组织的表达量高于PePRE2和PePRE4。PePRE1和PePRE3分别在叶枕及节间高量表达。PePREs在正伸长节间的表达量显著高于近成熟的节间,体现PePREs在调节细胞伸长过程中可能发挥重要作用。在拟南芥中过表达PePREs,植株在不同程度上出现下胚轴伸长,叶色浅绿,叶柄增长及早花等表型,这与过表达AtPRE1的表型相似。用不同浓度PPZ处理PePREs OE株系,在一定PPZ浓度范围内,PePREs OE下胚轴变短。相比野生型,PePREs OE对PPZ处理更加敏感。PePREs OE可以恢复pre-amiR下胚轴变短,叶柄缩短,叶色深绿及晚花的表型。综合可见PePREs发挥了与AtPRE1类似促进细胞伸长的功能。通过共聚焦显微镜观察PePREs在拟南芥根部细胞的亚细胞定位,PePREs在细胞核、细胞质和细胞膜上均有表达,其中PePRE1和PePRE3在根部出现明显零星的点状分布。该分布在BFA(BrefeldinA,蛋白转运抑制剂)处理转变为数量较少的块状分布,去除BFA后点状分布特征可恢复。这表明PePRE1/3可能存在胞质内的转运。本研究结果显示毛竹PePREs可能在毛竹细胞伸长具有促进作用。PePREs在拟南芥中功能保守,对细胞伸长具有显著促进作用。毛竹PePREs基因功能的研究,为进一步解析HLH转录因子在毛竹速生生长过程中响应激素及环境信号的机制研究提供支持。
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