目的：肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）是一类炎症因子，整合素β1是存在于细胞膜上的一中跨膜信号分子，一氧化氮（nitric oxide, NO）是一种短效自由基，这三种物质在细胞活动中发挥不同的生物作用。我们的实验目的是了解TNF-α在成骨细胞活性、凋亡、整合素β1表达、NO代谢中的作用以及TNF-α与整合素β1对成骨细胞凋亡和NO代谢的影响。方法：1.运用小鼠颅盖骨原代培养鉴定和传代的方法获得生长状态良好的成骨细胞。2.将TNF-α与α-MEM培养基配成混悬液，按0μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L的TNF-α浓度与成骨细胞共培养，按时间段分为24h和48h组。3.按TNF-α浓度梯度和时间组用酶标仪检测成骨细胞活性和碱性磷酸酶（alkalinephosphatase,ALP）活性。4.按TNF-α浓度梯度和时间组采用流式细胞仪检测成骨细胞整合素β1的表达和凋亡，按格里思法检测氧化氮的代谢产物——亚硝酸根离子（NO₂^-），代表NO的浓度。5.使用整合素封闭剂封闭整合素β1，按TNF-α浓度梯度检测成骨细胞凋亡，研究整合素和TNF-α的交互作用。结果：1.实验获得的成骨细胞在3代时生长状态稳定。成骨细胞进行骨结节诱导和染色后，出现钙化的骨结节。细胞活性较好适宜进行药物实验。2.随着TNF-α浓度的升高和培养时间的延长，成骨细胞活性和碱性磷酸酶活性减低，凋亡增多。3.48h，TNF-α的浓度为10μg/L时NO₂^-含量达最大值；培养时间的延长NO₂^-的代谢含量维持在一个较高的浓度，与对照组有显著性差异（P＜0.01）。4.随着TNF-α浓度的升高和培养时间的延长，成骨细胞整合素β1表达减少。5.整合素β1封闭后，共培养的TNF-α浓度的升高，成骨细胞凋亡较未封闭组增多；NO₂^-的浓度较未封闭组无明显变化。结论：1. TNF-α可以降低成骨细胞活性和碱性磷酸酶活性，且具有一定的时间和浓度依赖性。2.单一的TNF-α可以促进成骨细胞NO的代谢和释放，48h，TNF-α的浓度为10μg/L时，呈峰值表达；TNF-α可以诱导成骨细胞凋亡。整合素β1对成骨细胞NO代谢无明显相关性。3.成骨细胞在培养过程中，整合素β1的表达呈阳性。高浓度TNF-α能够抑制成骨细胞整合素β1的表达，具有浓度和时间依赖性。在诱导成骨细胞凋亡，整合素β1和TNF-α具有拮抗作用。