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目的:本研究通过观察当归补血汤对妊娠期缺铁性贫血大鼠肝脏细胞中转铁蛋白受体1(TfR1)、转铁蛋白受体2(TfR2)表达的影响,探讨当归补血汤治疗妊娠期缺铁性贫血大鼠时,在大鼠肝脏组织细胞中的部分作用机理,为今后临床中更好地治疗该疾病提供理论依据。
方法:选取105只SPF级的健康的wistar雌性大鼠,鼠龄6-7周,体重160-180g,适应性喂养1周后按照随机数字表,随机分为空白对照组(15只)、低铁组(90只)。前者饲喂以标准饲料、饮自来水,后者饲喂以低铁饲料、饮去离子水,造模过程中给低铁组大鼠的眼眶静脉少量放血3次。4周后,筛选出低铁组Hb<110g/L的大鼠。购同品系成年雄鼠53只,鼠龄9-10周,体重300士25g。将筛选出的雌鼠、空白对照组雌鼠与雄鼠按2:1同笼交配,第二天早晨九点前用沾有少量生理盐水的湿棉签在雌鼠的阴道里轻轻地旋转2圈做阴道涂片,以在低倍镜下观察到精子或阴栓(孕第0d)开始计算妊娠期。空白对照组不变,低铁组孕中期(孕第11天)再次自由分成其他六组以及各组给药:(1)空白组及模型组:灌胃生理盐水;(2)单纯当归补血汤组:给灌胃中剂量的当归补血汤水煎液;(3)单纯琥珀酸亚铁组:给灌胃琥珀酸亚铁水溶液;(4)低剂量当归补血汤+琥珀酸亚铁组:给灌胃低剂量的当归补血汤水煎液联合琥珀酸亚铁水溶液;(5)中剂量当归补血汤+琥珀酸亚铁组:给灌胃中剂量的当归补血汤水煎液联合琥珀酸亚铁水溶液;(6)高剂量当归补血汤+琥珀酸亚铁组:给灌胃高剂量的当归补血汤水煎液和琥珀酸亚铁水溶液。实验期间各组所喂相对应饲料及饮用水不变。给灌胃至产后第21天仔鼠断乳,末次给药后各组的大鼠禁食但不禁水12小时后,腹腔注射麻醉药物采取血液样本后做心脏灌注,待肝脏颜色变浅后取得各检测样本。
结果:1.与空白组作比较,模型组的大鼠的RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC及SF均有所下降,差异具有显著的统计学差异(P<0.01);与模型组作比较,当归补血汤的各剂量组联合琥珀酸亚铁的上述血液指标及SF均升高,其中以高、中剂量的当归补血汤联合琥珀酸亚铁组疗效最显著,有显著性统计学差异(P<0.01);与单纯琥珀酸亚铁组比较,高、中剂量当归补血汤联合琥珀酸亚铁组血常规上述多项指标及SF上升明显,有统计学意义(P<0.05)。2.大鼠肝脏组织HE染色后,空白对照组大鼠肝细胞形态正常,中央静脉周围的肝细胞索排列整齐、紧密;模型组大鼠肝细胞形态正常,中央静脉周围肝细胞索排列稍紊乱;给药后的各组大鼠肝细胞与空白对照组大鼠肝细胞形态无差异,肝细胞索排列趋于整齐、紧密。3.与模型组比较,当归补血汤各剂量组联合琥珀酸亚铁大鼠肝脏的TfR1、TfR2表达减少,差异具有统计学意义(P<0.05),其中高、中剂量当归补血汤联合琥珀酸亚铁组具有显著性统计学差异(P<0.01)。
结论:1.本实验改良并成功复制了妊娠期缺铁性贫血模型,为后续造模提供参考方法;2.本实验研究证实了当归补血汤可以辅助琥珀酸亚铁更好地改善妊娠期缺铁性贫血,并且降低了铁剂带来的胃肠道副反应;3.当归补血汤联合琥珀酸亚铁可以更好地改善妊娠期缺铁性贫血大鼠血常规各基线水平,其作用机理可能通过调控大鼠肝脏相关因子TfR1、TfR2的表达来实现。
方法:选取105只SPF级的健康的wistar雌性大鼠,鼠龄6-7周,体重160-180g,适应性喂养1周后按照随机数字表,随机分为空白对照组(15只)、低铁组(90只)。前者饲喂以标准饲料、饮自来水,后者饲喂以低铁饲料、饮去离子水,造模过程中给低铁组大鼠的眼眶静脉少量放血3次。4周后,筛选出低铁组Hb<110g/L的大鼠。购同品系成年雄鼠53只,鼠龄9-10周,体重300士25g。将筛选出的雌鼠、空白对照组雌鼠与雄鼠按2:1同笼交配,第二天早晨九点前用沾有少量生理盐水的湿棉签在雌鼠的阴道里轻轻地旋转2圈做阴道涂片,以在低倍镜下观察到精子或阴栓(孕第0d)开始计算妊娠期。空白对照组不变,低铁组孕中期(孕第11天)再次自由分成其他六组以及各组给药:(1)空白组及模型组:灌胃生理盐水;(2)单纯当归补血汤组:给灌胃中剂量的当归补血汤水煎液;(3)单纯琥珀酸亚铁组:给灌胃琥珀酸亚铁水溶液;(4)低剂量当归补血汤+琥珀酸亚铁组:给灌胃低剂量的当归补血汤水煎液联合琥珀酸亚铁水溶液;(5)中剂量当归补血汤+琥珀酸亚铁组:给灌胃中剂量的当归补血汤水煎液联合琥珀酸亚铁水溶液;(6)高剂量当归补血汤+琥珀酸亚铁组:给灌胃高剂量的当归补血汤水煎液和琥珀酸亚铁水溶液。实验期间各组所喂相对应饲料及饮用水不变。给灌胃至产后第21天仔鼠断乳,末次给药后各组的大鼠禁食但不禁水12小时后,腹腔注射麻醉药物采取血液样本后做心脏灌注,待肝脏颜色变浅后取得各检测样本。
结果:1.与空白组作比较,模型组的大鼠的RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC及SF均有所下降,差异具有显著的统计学差异(P<0.01);与模型组作比较,当归补血汤的各剂量组联合琥珀酸亚铁的上述血液指标及SF均升高,其中以高、中剂量的当归补血汤联合琥珀酸亚铁组疗效最显著,有显著性统计学差异(P<0.01);与单纯琥珀酸亚铁组比较,高、中剂量当归补血汤联合琥珀酸亚铁组血常规上述多项指标及SF上升明显,有统计学意义(P<0.05)。2.大鼠肝脏组织HE染色后,空白对照组大鼠肝细胞形态正常,中央静脉周围的肝细胞索排列整齐、紧密;模型组大鼠肝细胞形态正常,中央静脉周围肝细胞索排列稍紊乱;给药后的各组大鼠肝细胞与空白对照组大鼠肝细胞形态无差异,肝细胞索排列趋于整齐、紧密。3.与模型组比较,当归补血汤各剂量组联合琥珀酸亚铁大鼠肝脏的TfR1、TfR2表达减少,差异具有统计学意义(P<0.05),其中高、中剂量当归补血汤联合琥珀酸亚铁组具有显著性统计学差异(P<0.01)。
结论:1.本实验改良并成功复制了妊娠期缺铁性贫血模型,为后续造模提供参考方法;2.本实验研究证实了当归补血汤可以辅助琥珀酸亚铁更好地改善妊娠期缺铁性贫血,并且降低了铁剂带来的胃肠道副反应;3.当归补血汤联合琥珀酸亚铁可以更好地改善妊娠期缺铁性贫血大鼠血常规各基线水平,其作用机理可能通过调控大鼠肝脏相关因子TfR1、TfR2的表达来实现。