1.研究背景　　 宫颈癌（cervical carcinoma）是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，在全球女性恶性肿瘤中的发病率仅次于乳腺癌，在我国其发病率一直居妇科肿瘤首位。流行病学研究提示宫颈癌高发区常伴较高的食管癌发病率，如山西阳城、新疆石河子、河南豫北地区，且在河南地区子宫颈癌在女性是仅次于食管癌的第二位恶性肿瘤。宫颈癌和食管癌好发部位均发生在与外界相通的鳞状上皮和柱状上皮交界部位，两者组织学类型均以鳞状细胞癌为主，宫颈鳞癌（cervical squamous cell carcinoma，CSCC）约占80％～85％，食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）约占90％～95％。宫颈癌和食管癌的形态学发病模式相似：宫颈癌为：基底细胞损伤-宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia.CIN）CINⅠ-CINⅡ-CINⅢ-原位癌-浸润癌；食管癌：食管粘膜上皮基底细胞过度增生（basal cell hyperplasia，BCH）、不典型增生（dysplasia，DYS）和原位癌（carcinoma in situ，CIS）-浸润癌；是一个多阶段进行性过程可有逆向性转变，这些形态学改变是CSCC和ESCC高易感人群癌变过程的重要特征。　　 以上现象提示这两种肿瘤可能具有相似的致病危险因素和发病机制，人乳头瘤病毒（human pappillomavirus，HPV）感染是宫颈上皮内瘤变及宫颈癌发生的必要因素，过去二十年的研究证明HPV在宫颈癌变机制中起着很重要的作用，尽管HPV在食管癌发病机制的研究中已有报道，但具体的致癌作用仍不清楚。有关比较同一地区两种肿瘤HPV感染率的研究未见报道。　　 蛋白质组学的兴起为癌症机制的研究提供了理想的技术平台，对寻找其相关生物标记，探讨其发病机制，开发新的药物等有着重要的意义，MALDI-TOF-MS（matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry，基质辅助激光解析附电离飞行时间质谱）是一种检测大量多肽和蛋白质的独特方法，特别在识别反应生物机理和细胞途径状态的复杂蛋白质组图谱方面成效显著，具有灵敏度高，分辨率高，准确度高，图谱简明，样品用量少和高通量，质量范围广及速度快等特点。　　 弱阳离子交换磁珠（MB-WCX）捕获低丰度蛋白，借助于MALDI-TOF-MS技术的自动操作程序以同时检测血清中存在的各种肽段，此系统的灵敏性优于芯片表面俘获，因为球状颗粒的结合表面积较小直径斑点更大，因此结合能力也更强。与高分辨率MS联用时，可同时检测一滴血清中的数百种肽段，并且多数可不经再次分级而直接测定。这一自动化特性使得操作方便，并保证了实验结果的重现性。　　 本课题组首先采用PCR和凯普导流杂交HPV DNA检测法（HybriMax）技术联合应用，以了解宫颈鳞癌和食管鳞癌同时高发的地区这一特殊人群的HPV感染情况，而后采用MB-WCX、MALDI-TOF-MS及相关软件对来自同一地区的宫颈鳞癌、食管鳞癌血清蛋白质质谱进行比较研究，建立各自的蛋白质指纹图谱，筛选各自肿瘤相关蛋白，并进行对比分析，最后用免疫组化方法和MSP方法验证候选蛋白在宫颈鳞癌和食管鳞癌及其癌旁正常组织中蛋白表达及基因甲基化特征，为宫颈鳞癌、食管鳞癌的基础研究、临床诊断以及特异性肿瘤标志物的筛选提供重要的理论依据。　　 2.材料与方法　　 2.1研究对象　　 2.2样本（血清、组织）的收集　　 2.3方法　　 3.结论　　 3.1同一地区居民宫颈、食管鳞癌HPV感染亚型和频率非常相似，提示HPV可能是这2种肿瘤的共同致病因素，HPV16可能在宫颈和食管癌变过程中起重要作用，为该2种肿瘤的生物防治提供了重要理论依据。　　 3.2在宫颈鳞癌组、食管鳞癌组分别与对照组蛋白质组对比发现M1865.58，M2104.84，M4070.93，M4209.83的蛋白在两种肿瘤中均表达下调，而质荷比为M5756.02的蛋白表达上调，提示该5种蛋白为宫颈、食管鳞癌的重要候选蛋白，同时提示该地区宫颈、食管鳞癌之间存在相似的分子基础。　　 3.3在宫颈上皮内瘤变组、食管上皮不典型增生组蛋白质对比发现M2660.1，M4209.83的蛋白在两种肿瘤癌前病变组中均表达下调，M2862.82，M1349.67，M1740.76的蛋白均表达上调。提示该5种蛋白为2种肿瘤癌前病变的重要候选蛋白，同时提示在宫颈癌和食管癌的发生发展中存在相似的分子基础。　　 3.4通过对宫颈鳞癌和食管鳞癌不同病理分期的蛋白质组分析，发现M5904.14，M5264.26的2种蛋白与宫颈鳞癌分化程度密切相关，M6526.86的蛋白与食管鳞癌病理分期密切相关的蛋白质，提示这些蛋白是宫颈鳞癌和食管鳞癌预后的重要分子基础。　　 3.5 CK14和Gastrin蛋白在正常组织中低表达，在宫颈鳞癌和食管鳞癌中高表达，与血清蛋白质谱结果一致，且与甲基化结果呈负相关。