论文部分内容阅读
蓝莓是杜鹃花科、越桔属植物,因其果实具有较高的营养价值和保健价值而深受广大消费者的喜爱。虽然我国对蓝莓已有30多年的栽培历史,但由于蓝莓根系在土壤中分布较浅、无根毛,所以很容易受到干旱环境的影响。前人研究表明,深色有隔内生真菌(DSE)的接种能够提高植物对干旱环境的抗性。因而我们从省内栽培的蓝莓根系中分离土著深色有隔内生真菌,然后将分离的真菌接入蓝莓无菌苗中,筛选对蓝莓生长有促进作用并能提高其抗旱性的菌株。1、蓝莓根部内生真菌的分离我们从乳山的蓝莓基地中采集与蓝莓主根系相连的须根系作为实验材料,从中分离得到58株内生真菌。经初步的形态观察,选取10株菌丝有明显隔的真菌进行接种效应分析。2、DSE与蓝莓无菌苗的共培养选择以灭菌的苔藓为共培养基质,将上述10种内生真菌分别与蓝莓组培苗进行共生培养。共生培养2个月后,与未接菌的蓝莓苗相比,接种R225和R249菌株的蓝莓苗根系发达、叶色浓绿、植株的分蘖数多。取接菌蓝莓苗的根系,分析菌株在根内的定植情况,结果显示,R249菌株在蓝莓根内定殖,在皮层细胞中形成有隔菌丝及微菌核等结构,但未发现R225菌株在蓝莓根内有定殖。3、R249真菌对蓝莓幼苗抗干旱胁迫生理的研究用不同浓度的PEG6000溶液处理接种R249和不接菌的蓝莓苗,然后测定蓝莓叶片中的丙二醛含量、脯氨酸含量和叶绿素含量。结果显示:接种R249菌株的蓝莓苗比不接菌蓝莓苗叶片的丙二醛含量低,脯氨酸和叶绿素的含量高,说明R249菌株的接种能够提高蓝莓苗的抗旱性。4、R225和R249菌株的形态及分子生物学鉴定通过对R225和R249菌株的菌落、菌丝观察以及对菌丝rDNA-ITS序列分析,将菌株R225鉴定为阿斯佩拉微球菌(Minutisphaera aspera);将R249菌株鉴定为座囊菌纲(Dothideomycetes)的一种。Minutisphaera aspera和Dothideomycetes sp.都属于子囊菌门,座囊菌纲。5、碳源、氮源对R225和R249菌株生长的影响实验以MMN固体培养基为基础培养基,用不同碳源和氮源分别对R225和R249真菌进行培养。结果显示:R225和R249菌株在含有不同碳、氮源的MMN固体培养基中都能生长。其中,R249以葡萄糖和硝酸铵为单一碳、氮源时菌丝的扩展直径最大,以木糖和硝酸钠为单一碳、氮源时菌丝的干重最大;R225以碳酸氢钠和酪蛋白为单一碳、氮源时菌丝的扩展直径最大,以葡萄糖、甘氨酸为单一碳、氮源时菌丝的干重最大。6、蓝莓果实中肌醇的代谢分析由于肌醇对人类健康有益,对植物的正常发育以及提高植物的抗旱性方面具有独特的功能,所以肌醇在植物可食用器官中的代谢机制已成为近年来很多研究的焦点。本实验对栽培蓝莓‘伯克利’和‘蓝丰’整个果实发育过程中的肌醇含量进行分析。第一次从北高从蓝莓中分离出2个VcMIPS基因(VcMIPS1和VcMIPS2)和一个VcMIOX基因。其中,VcMIPS2和VcMIOX基因的表达模式显示这些基因与果实成熟过程中肌醇含量的变化有关。结果表明,肌醇的生物合成和氧化过程在决定肌醇水平的整个蓝莓发育过程中扮演重要角色。