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[目的]对多重脑震荡(multiple cerebral concussion,MCC)大鼠远期行为学变化进行系列研究,评价大鼠损伤12个月后空间认知学习与短时工作记忆、焦虑与抑郁样情感行为、平衡运动功能的变化状况,以了解慢性创伤性脑病(Chronic Trauma Encephalopathy,CTE)行为学变化特征。[方法](1)动物分组:成年健康雄性SD大鼠120只,体重260±20g,随机分为正常对照组(N组),一次性脑震荡(Pure Cerebral Concussion,PCC组),二重脑震荡(2MCC组),三重脑震荡(3MCC组)。每组30只。(2)模型复制:应用金属单摆闭合性大鼠脑损伤打击装置,每间隔24h打击一次,根据打击次数,分别复制一次性脑震荡(PCC),二重脑震荡(2MCC)和三重脑震荡(3MCC)。(3)长期饲养观察:模型复制成功后,对上述各组大鼠进行12个月观察饲养后进行行为学实验。(4)应用横杆跑动实验(beam walking test,BW)实验和平衡木实验(beambalancetest，BB),评价各实验组大鼠平衡功能和运动协调功能;应用Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)实验,评价各实验组大鼠空间认知学习与短时工作记忆:应用高架十字迷宫(high plus maze,HPM)、旷场试验(open filed test,OFT)及强迫游泳实验(forced swimming test,FST),评价各实验组大鼠损伤12个月后焦虑与抑郁样行为变化。各实验组结果进行统计分析比较。[结果](1)BB评分结果:与N组比较,2MCC和3MCC组在实验第1、2天差异有统计学意义,P<0.05,PCC组在实验各时间差异均无统计学意义,P>0.05;与PCC组比较,3MCC组在实验第1天的差异有统计学意义,P<0.05,N组和2MCC组在实验各时间差异均无统计学意义,P>0.05;与2MCC组比较,N组和3MCC组在实验各时间差异有统计学意义,P<0.05,PCC组在实验各时间差异均无统计学意义,P>0.05;与3MCC组比较,N组、PCC组、2MCC组在实验第1天差异有统计学意义,P<0.05,N组在实验第2天的差异有统计学意义,P<0.05,其余时间点差异无统计学意义,P>0.05。(2)BW评分结果:①穿越平衡木时间:与N比较,3MCC组在第2、3、4天差异有统计学意义,P<0.05,PCC、2MCC组在各时间差异均无统计学意义,P>0.05;与PCC组比较,N、2MCC、3MCC组在各时间点差异均无统计学意义,P>0.05;与2MCC组比较,N、PCC、3MCC组在各时间点差异均无统计学意义,P>0.05;与3MCC组比较,N组在第2、3、4天差异有统计学意义,P<0.05,PCC、2MCC组在各时间点差异均无统计学意义,P>0.05。②穿越平衡木肢体踩空次数:与N比较,3MCC组在第1、2、3、4天差异有统计学意义,P<0.05,2MCC组在第1、2天差异有统计学意义,P<0.05,PCC组在各时间点差异无统计学意义,P>0.05;与PCC组比较,3MCC组第1、2天差异有统计学意义,P<0.05,N组、2MCCC组在各时间点差异无统计学意义,P>0.05;与2MCC组比较,3MCC组在第1天差异有统计学意义,P<0.05,N组在第1、2天差异有统计学意义,P<0.05,PCC组各时间点差异均无统计学意义,P>0.05;与3MCC组比较,N组在第1、2、3、4天差异有统计学意义,P<0.05,PCC在第1、2天差异有统计学意义,P<0.05,2MCC组第1天差异有统计学意义,P<0.05。(3)MWM测试结果:①在MWM整个实验中:损伤大鼠,与正常组比较,3MCC组逃避潜伏期差异均有统计学意义,P<0.05。②在水下平台实验中:与N组比较,3MCC组在第5天逃避潜伏期差异有统计学意义,P<0.05。③在水上平台实验中:第6天,与N组比较,3MCC组逃避潜伏期差异均有统计学意义,P<0.05;第7天,与N组比较,3MCC组在逃避潜伏期差异均有统计学意义,P<0.05。④在无平台试验中:与N组比较,3MCC组在第一象限停留时间差异有统计学意义,P<0.05;与N组比较,2MCC、3MCC组在第二象限停留时间差异有统计学意义,P<0.05。⑤在反转平台试验中:第一天,与3MCC组比较,N、PCC、2MCC组逃避潜伏期差异均有统计学意义,P<0.05;与N组比较,2MCC、3MCC组逃避潜伏期差异有统计学意义,P<0.05;第二天,与N组比较,3MCC组逃避潜伏期差异有统计学意义,P<0.05;第三天,与3MCC组比较,N、PCC、2MCC组逃避潜伏期差异均有统计学意义,P<0.05。(4)FST测试结果:与N组比较,2MCC、3MCC组C行为频次差异有统计学意义,P<0.05,PCC组C行为频次差异无统计学意义,P>0.05:与PCC组比较,3MCC组C行为频次差异有统计学意义,P<0.05,N、2MCC组C行为频次差异无统计学意义,P>0.05。(5)OFT测试结果:①周边区域行走格数:组间比较差异均无统计学意义,P>0.05;②周边区域行走时间:与N组比较,PCC、2MCC、3MCC组周围区域时间差异均有统计学意义,P<0.05;其余组间比较差异无统计学意义,P>0.05;③周边区域行走速度:各组之间相互比较差异均无统计学意义,P>0.05;④中央区域行走格数:与N组比较,PCC、2MCC、3MCC组中央格数差异均有统计学意义,P<0.05;其余组间比较差异无统计学意义,P>0.05;@中央区域行走时间:与N组比较,PCC、2MCC、3MCC组中央时间差异均有统计学意义,￡P<0.05:其余组间比较差异无统计学意义,P>0.05;⑥中央区域行走速度:与N组比较,2MCC、3MCC组中央速度差异均有统计学意义,P<0.05;其余组间比较差异无统计学意义,P>0.05;⑦周边区域与中央区域总行走格数:各组间比较差异无统计学意义,P>0.05;⑧站立次数:各组之间相互比较差异均无统计学意义,P>0.05;⑨梳理毛发次数:各组之间相互比较差异均无统计学意义,P>0.05。⑩梳理毛发时间:各组之间相互比较差异均无统计学意义,P>0.05。(6)HPM测试结果:①开臂进入次数:与N组比较,PCC、2MCC、3MCC组差异均有统计学意义,P<0.05;②开臂进入时间:与N组比较,2MCC、3MCC组差异均有统计学意义,P<0.05;③开臂探头次数:与N组比较,PCC、2MCC,3MCC组差异均有统计学意义,P<0.05;④闭臂进入次数:与N组比较,3MCC组有统计学意义,P<0.05;④闭臂进入时间:与N组比较,3MCC组有统计学意义,P<0.05;⑥闭臂站立次数:与N组比较,2MCC、3MCC组差异均有统计学意义,P<0.05;⑦闭臂梳理毛发次数:与N组比较,PCC、2MCC、3MCC组差异均有统计学意义,P<0.05;⑧进臂总次数:与N组比较,PCC、2MCC、3MCC组差异均有统计学意义,P<0.05。[结论]1.3MCC大鼠损伤12个月后,出现了明显的平衡与运动功能异常,而且比一次和二次性脑震荡大鼠的平衡运动、共济协调损伤更加严重。2.3MCC大鼠损伤12个月后,出现了明显的空间认知与短时工作记忆行为异常,而且比一次和二次性脑震荡大鼠的空间学习记忆、短时工作记忆损伤更加严重。3.3MCC大鼠损伤12个月后,出现了明显的焦虑样与抑郁样情感行为异常,而且比一次和二次性脑震荡大鼠的情感行为损伤更加严重。4.综合上述,在该实验研究中,间隔24h连续打击大鼠三次,可以成功复制出大鼠远期CTE多种行为学损伤改变,故3MCC大鼠可以在伤后远期(12个月)发展成为CTE大鼠。