目的:分析母乳性黄疸患儿肠道菌群特征,筛选与差异细菌有相互作用位点的母乳外泌体miRNA,说明miRNA可能通过调节乳儿肠道菌群影响新生儿母乳性黄疸的发生发展。方法:选取2018.1-2018.6因“新生儿高胆红素血症”收入上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心新生儿病房、临床排他性诊断为母乳性黄疸的患儿为实验组,将同期在“优艾贝”国际月子会所的纯母乳喂养健康无黄疸新生儿作为对照组,每组各10例,收集母乳和新生儿粪便样本。本研究利用16S rRNA高通量测序分析两组粪便样本肠道菌群特征,筛选出可能与新生儿胆红素代谢相关的差异性特殊菌种,然后用透射电镜和Western blotting两种方法鉴定从母乳中提取的外泌体囊泡,并通过miRBase数据库预测与特异性细菌基因组有相互作用位点的miRNA,利用荧光定量PCR验证预测的miRNA在母乳外泌体中表达的差异,探究母乳中差异表达的miRNA与肠道菌群的相关性。结果:(1)肠道菌群16S rRNA测序经生物信息学分析显示,母乳性黄疸患儿肠道细菌的物种丰富度和多样性与对照组相比无显著性差异,厚壁菌门、嗜血杆菌属较对照组低,变形菌门、埃希氏菌属、摩根菌属、罗斯氏菌属丰度较高。其中,大肠杆菌(E.coli)可能是影响胆红素肠肝循环的重要菌种。(2)通过miRBase数据库预测提示hsa-miR-16-5p与E.coli基因组存在相互作用位点,经荧光定量PCR验证母乳外泌体hsa-miR-16-5p在母乳性黄疸组中表达降低。结论:母乳外泌体miR-16-5p可能通过结合肠道微生物基因组对E.coli的生长发挥潜在调节作用,影响新生儿胆红素肠肝循环,可能是母乳性黄疸的发病机制之一。