cDNA-AFLP改良法分离草菇低温诱导表达基因和草菇ras启动子的克隆

来源 :华南热带农业大学 海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dapao123456789
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该研究利用cDNA-AFLP改良法分离了13个草菇菌丝低温诱导表达基因v1,v2,v3,v4,v5,v6,v7,v8,v9,v10, v11,vl2,vl3.DNA序列测定结果表明,V1为488bp,V2为551bp,V3为557bp,V4为285bp,V5为173bp,V6为604bp,V7为743bp,V8为836bp,V9为709bp,V10大约为720bp(未测完),Vll和Vl2是同一基因片段为1077bp,Vl3为617bp.该研究以草菇基因组DNA为模板,设计了一对引物(rasR1,rasF1),利用PCR技术克隆了草菇的一段启动子片段r5a.DNA序列测定结果及DNA序列对比结果显示:该启动子序列(r5a)与已知的食用菌ras启动子同源率低,采用Plant Prediction和plant care软件对克隆的草菇启动子片段进行分析,结果表明该启动子序列的243-293bp及539-589b区域为预测的基础启动子区,有两个转录起始位点(283bp及579bp处),有多种重要的顺式作用元件,如TATA-box,CAAT-box,G-box, ABRE元件, WUN-motif,HSE元件, p-box,TATC-Vbox,I-box等.
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