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目的1、研究非小细胞肺癌患者中医辨证分型与临床病理特征之间的相关性,进一步比较分析非小细胞肺癌患者血清标本中凋亡相关因子表达水平的变化,探讨凋亡因子与非小细胞肺癌的相关性。2、通过观察芪玉三龙汤对A549细胞凋亡、Janus蛋白酪氨酸激酶2(Janus protein tyrosine kinase 2,JAK2)/信号转导和转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription protein 3,STAT3)信号通路及其下游凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma 2 gene,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bcl-2Associated X Protein,Bax)基因及蛋白表达的影响,探讨芪玉三龙汤调控A549细胞凋亡的作用机制。方法1、按照病例纳入标准筛选120例NSCLC病例,填写肺癌临床观察表,归纳患者中医辨证分型,明确患者中医辨证分型与临床病理特征的相关性;用ELISA法检测120例非小细胞肺癌患者及30例健康人群血清中Bcl-2及Bax的表达水平,分析两种凋亡指标在NSCLC患者血液标本中的诊断意义及价值。2、选取60只SD大鼠,随机分为空白对照组及中药组,分别予1m L/100g生理盐水及1m L/100g芪玉三龙汤药液(生药含量为1.396g/m L)灌胃,制备空白血清及芪玉三龙汤含药血清。A549是人肺腺癌细胞,本实验基于不同分组,加入不同浓度芪玉三龙汤含药血清及西药干预,对JAK2/STAT3信号通路中的JAK2、STAT3及凋亡相关因子Bcl-2、Bax进行观察和检测,探讨芪玉三龙汤是否通过阻断JAK2/STAT3信号传导通路,进而调控凋亡相关因子来诱导细胞凋亡。结果1性别分布上,男性79例(65.8%),女性41例(34.2%),男女比例1.93:1;病理类型分布上,腺癌72例(60%),鳞癌45例(37.5%);临床TNM分期上,I期5例(4.17%),II期5例(4.17%),III期38例(31.7%),IV期72例(60%)。120例非小细胞肺癌中,中医证型以气虚痰湿型为多,占43.33%,余依次为气阴两虚型(21.67%),气滞血瘀型(15%)、阴虚毒热型(11.67%)和痰热阻肺型(8.33%)。2经统计分析,吸烟与中医证型分布间无差异性。不同证型间性别构成、年龄分布也无明显差异。NSCLC以肺腺癌、肺鳞癌为主,经统计分析认为NSCLC患者中病理类型为肺腺癌、肺鳞癌者,其中医证型表现基本类似,临床以气虚痰湿型、气阴两虚型较为多见。NSCLC TNM分期以III期和Ⅳ期为主,经统计分析认为III期、Ⅳ期NSCLC患者中医证型基本类似,临床以气虚痰湿型、气阴两虚型较多见。3 NSCLC患者临床血清标本中凋亡相关因子Bcl-2分布与健康对照组相比无明显差异,Bax在两组间分布不同,Bax在血清标本中可作为NSCLC临床诊断的辅助指标。4芪玉三龙汤含药血清抑制A549细胞增殖具有浓度、时间依赖性,最佳作用浓度为20%,最佳作用时间24h;AG490抑制A549细胞增殖具有浓度、时间依赖性,最佳作用浓度为75umol/L,最佳作用时间24h。RT-q PCR示:芪玉三龙汤含药血清可抑制Bcl-2 m RNA表达,促进Bax m RNA表达,而对JAK2 m RNA、STAT3m RNA转录水平无明显影响。Western Blot示:芪玉三龙汤含药血清可抑制Bcl-2蛋白水平,促进Bax蛋白表达,抑制p-jak2、p-stat3蛋白表达。5回复实验示:IL-6促进bcl-2 m RNA及蛋白表达,抑制bax m RNA及蛋白表达,同时p-JAK2,p-STAT3蛋白表达也升高。IL-6+中药组能显著抑制bcl-2 m RNA水平,促进bax m RNA表达;能明显抑制IL-6引起的p-JAK2,p-STAT3蛋白表达的升高,抑制bcl-2蛋白表达的升高。结论1 NSCLC患者中医证型分布以气虚痰湿型最多。病理类型表现为肺腺癌、肺鳞癌者,其病理类型与中医证型间无明显差异;TNM分期为III期、Ⅳ期NSCLC患者,其病理分期与中医证型间无明显差异。NSCLC患者血清标本中凋亡相关因子Bcl-2分布与健康对照组相比无明显差异,Bax表达水平低于健康对照组,Bax在血清标本中可作为NSCLC临床诊断的辅助指标。2芪玉三龙汤能够诱导A549细胞凋亡,其机制与抑制JAK2/STAT3信号通路,抑制下游Bcl-2水平,促进Bax表达有关。