论文部分内容阅读
复发性流产(Recurrent Spontaeous Abortion, RSA)是指连续发生2次或2次以上的自然流产,发病率约占育龄夫妇的5%。RSA的病因复杂,排除临床上可查出的病因,仍有近1/2的RSA患者的病因未明,称为不明原因复发性流产(Unexplained recurrent spontaneous abortion URSA),是临床上难治性的不育症。第一部分反复性自然流产病因分析目的：探讨RSA患者的临床病因。方法：对74对RSA夫妇进行规范化病因筛查,包括夫妇染色体核型分析、生殖道解剖结构检查、内分泌激素检查、生殖道感染因素检查以及自身免疫抗体检测,以分析RSA的病因、建立RSA病因筛查的临床路径。结果：在74对RSA夫妇中,染色体异常6例,占8.1%；生殖道解剖异常4例,占5.4%；内分泌异常13例,占17.6%；生殖道感染5例,占6.8%；免疫异常46例,占62.1%,其中自身免疫异常14例,占18.9%；同种免疫异常(不明原因)32例,占43.2%。结论：RSA病因复杂,包括染色体异常,生殖道解剖结构异常,内分泌代谢异常,生殖道感染,免疫异常等因素。免疫因素在RSA的病因中占重要地位,免疫异常中约有2/3原因不明,临床上称为URSA。病因学的探讨以及针对病因进行预防性治疗是防治RSA的关键。第二部分趋化因子CXCL12、CCL2、RANTES表达异常与URSA发病的关系目的：探讨URSA患者绒毛、蜕膜基质细胞衍生因子(CXCL12)、单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)、调节活化正常T细胞表达和分泌的因子(RANTES)-mRNA表达异常和血清CXCL12、CCL2、RANTES水平变化与URSA发病的关系。方法：收集URSA患者26例(URSA组)和正常早孕妇女30例(对照组)的绒毛、蜕膜和血清标本,应用实时荧光PCR方法检测两组绒毛、蜕膜CXCL12、CCL2、RANTES-mRNA的表达,应用ELISA方法检测两组血清CXCL12、CCL2、RANTES的蛋白含量。结果：1)人早孕绒毛、蜕膜组织均有趋化因子CXCL12、CCL2、RANTES-mRNA表达。2)URSA组绒毛、蜕膜组织CXCL12-mRNA的表达量为(0.46±0.15,0.35±0.13),均较对照组(1.79±0.82,0.81±0.21)显著降低(P<0.01)：CCL2-mRNA的表达量为(1.99±0.35,2.77±0.61),均较对照组(1.42±0.28,1.90±0.85)显著升高(P<0.01)；RANTES-mRNA的表达量为(1.40±0.25,2.25±0.33),均较对照组(0.94±0.22,1.45±0.20)显著升高(P<0.01)。3)URSA组血清CXCL12的蛋白含量为(94.52±29.23pg/ml),对照组为(268.13+26.36pg/ml),两组相比,差异有显著性(P<0.01)；CCL2的蛋白含量为(83.34±10.61pg/ml),对照组为(59.41±9.70pg/ml),两组相比,差异有显著性(P<0.01)；RANTES的蛋白含量为(117.29±18.67pg/ml),对照组为(79.88±12.54pg/ml),两组相比,差异有显著性(P<0.01)。4)两组血清CXCL12值与绒毛、蜕膜CXCL12-mRNA表达量呈正相关,相关系数分别为0.723,0.604(P均<0.01)；CCL2值与绒毛、蜕膜CCL2-mRNA表达量呈正相关,相关系数分别为0.595,0.655(P均<0.01)；RANTES值与绒毛、蜕膜RANTES-mRNA表达量呈正相关,相关系数分别为0.482,0.675(P均<0.01)。结论：CXCL12、CCL2、RANTES表达于人早孕绒毛和蜕膜组织中,参与母胎界面绒毛滋养细胞和蜕膜免疫活性细胞功能的调控；绒毛、蜕膜组织CXCL12低表达,CCL2、RANTES高表达与URSA的发病机制有关；血清CXCL12、CCL2、RANTES在胚胎停育的早期诊断中具有重要的临床意义。第三部分：米非司酮对早孕绒毛、蜕膜趋化因子CXCL12、CCL2、RANTES表达的影响目的：探讨孕激素受体拮抗剂米非司酮对早孕绒毛、蜕膜组织趋化因子CXCL12、CCL2、RANTES表达的影响。方法：收集服用米非司酮48小时后清宫的正常早孕妇女30例(米非司酮组)的绒毛、蜕膜标本,应用实时荧光PCR方法检测米非司酮组绒毛、蜕膜CXCL12、CCL2、RANTES-mRNA的表达,并与对照组比较。结果：米非司酮组绒毛、蜕膜组织CXCL12-mRNA的表达量为(0.59±0.22,0.42±0.17),均较对照组显著降低(P<0.01)；CCL2-mRNA的表达量值为(1.84±0.35,3.01±0.62),均较对照组显著升高(P<0.01)；RANTES-mRNA的表达量为(1.33±0.22,2.17±0.49),均较对照组显著升高(P<0.01)。结论：米非司酮通过影响早孕绒毛、蜕膜趋化因子CXCL12、CCL2、RANTES-mRNA的表达,破坏母胎界面免疫耐受机制而发挥其抗早孕作用。