【摘 要】
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植物生长发育过程受到内外因子的诱导,其中细胞分裂素在调节细胞分裂和组织发育中起着非常重要的作用,而细胞分裂素响应启动子能够提供一种便于分析植物器官或组织中细胞分裂
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植物生长发育过程受到内外因子的诱导,其中细胞分裂素在调节细胞分裂和组织发育中起着非常重要的作用,而细胞分裂素响应启动子能够提供一种便于分析植物器官或组织中细胞分裂素分布的研究方法。本实验利用PCR技术从拟南芥基因组成功克隆得到植物细胞分裂素响应基因ARR5的启动子。由于ARR5编码的蛋白质对细胞分裂素有一定的响应作用,本实验中利用GUS融合技术,成功将报告基因GUS与拟南芥ARR5启动子融合,并构建了pBI101-ARR5-GUS植物表达载体,然后通过根癌农杆菌介导法分别将该表达载体导入拟南芥基因组和景天树基因组中。实验选用景天树幼叶为外植体,研究其再生和基因转化。通过根癌农杆菌介导法,得到再生的转基因景天树和拟南芥植株。本实验通过调节侵染外植体时农杆菌菌液的浓度,分析得到最佳侵染浓度。最后利用抗性筛选获得景天树和拟南芥抗性苗,并利用PCR进行验证。通过对抗性拟南芥幼苗进行GUS组织化学染色证明融合基因在拟南芥植株中成功表达。为进一步研究细胞分裂素在景天树分化过程中的分布、拟南芥衰老过程中的组织分布情况提供了试验材料。
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