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背景：脑是雌激素作用的重要靶器官，它不仅对脑内生殖相关区域有调节作用，而且对与认知功能有关的区域如大脑皮质、海马等亦有调节作用。大量基础研究表明当绝经时雌激素水平下降，不但会引起神经递质的合成、分泌及其受体功能受损，突触的数量和连接减少，还直接影响神经元的功能和生长。绝经妇女应用激素替代治疗(HRT)已有半个多世纪，有关HRT的利弊之争却从来没有停止过。为预防或治疗老年退化性认知功能减退的发生，人们做了很多临床和基础研究以探讨外源性雌激素对脑的结构和功能的影响，但结论不尽相同。有学者认为，这种分歧可能与HRT开始的时间差异有关，即HRT只有在围绝经期或绝经早期应用，并保持一定的雌激素水平才会对认知功能起到保护作用，而在绝经一段时间后神经系统的功能下降达一定水平，HRT的作用就会减弱或消失。为确定是否绝经早期开始HRT更好、受益更大、风险更小，以及绝经早期应用HRT是否对绝经晚期老年退化性认知功能减退的发生有预防作用，我们设计了此动物实验来探讨绝经后不同时期长期应用HRT对中枢神经系统的作用，为临床研究提供补充证据。目的：探讨去势后不同时期大鼠长期应用不同剂量雌、孕激素连续联合治疗(E+PT)后的行为学改变和大脑皮层及海马各种神经元及各种神经递质及受体的功能，以及神经形态学变化，从而对绝经后不同时期应用HRT在认知功能影响的利弊分析提供证据。方法：选择9-10月龄健康雌性SD大鼠，行双侧卵巢切除术(OVX)建立绝经模型。分别在绝经早期(OVX后三天)和晚期(OVX后4个月)给予低剂量CEE+MPA、高剂量CEE+MPA或安慰剂口服给药3个月(低量CEE0.07mg／kg／日，高量CEE为0.5mg／kg／日，均合用MPA 0.2mg／kg／日，生理盐水为安慰剂)。以Morris水迷宫观察大鼠空间认知能力变化，神经生化学测定皮层及海马相关酶类和受体活性(ChAT，MAO，NMDA-R和M-R)，并行额叶皮层及海马神经元计数，观察nNOS，βAPP的表达及分布，同时以透射电镜观察皮层及海马的超微结构变化和突触数量改变。结果：1．OVX大鼠模型：OVX术后出现了动情周期消失、体重增长等典型变化，绝经早期应用HRT可以逆转体重的增加，晚期HRT影响不明显。2．年龄和绝经对OVX大鼠各项指标的影响早期对照组在行为学上，只有记忆得分明显高于晚期对照组，其他指标与晚期对照组相似(P＞0.05)。并且早期对照组皮层和海马ChAT酶活性、MAO活性、nNOS表达、神经元计数及βAPP表达均与晚期对照组差异显著(P＜0.05)。而海马NMDA-R含量在早晚期对照组间没有差异(P＞0.05)。3．绝经后开始HRT的早晚对OVX大鼠各项指标的影响绝经早期，水迷宫结果中HRT组潜伏期、行程、记忆得分和正确认知策略使用率均明显优于安慰剂组(P＜0.05)。HRT还明显提高皮层和海马NMDA-R的含量、nNOS的表达和突触数量，降低βAPP的表达，下调海马MAO活性，并增加海马ChAT酶活性及神经元计数，与同期安慰剂组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，不同剂量HRT组间比较差异均没有统计学意义(P＞0.05)。低HRT可明显提高皮层ChAT酶活性和神经元计数(P＜0.05)，而高HRT的作用不明显，两者之间没有显著差异(P＞0.05)。绝经晚期，除高剂量HRT仍然可以增加海马NMDA-R的含量和CA1区突触计数外，其余各指标均与安慰剂组相似，不同剂量组间比较，差异也没有统计学意义(P＞0.05)。HRT的应用对皮层MAO活性无明显影响(P＞0.05)。额叶皮层及海马CA1区透射电镜观察：早期安慰剂组及晚期各组多数神经元和毛细血管有明显损伤表现，早期HRT组神经元及毛细血管形态及结构相对正常。4．绝经的早晚和HRT的应用剂量两个因素对各项认知功能指标的析因分析的结果单因素HRT应用剂量(水、低、高)对所有指标均无影响。单因素OVX的早晚作用的指标有：海马的ChAT、MAO活性和神经元计数，皮层的NMDA-R含量、nNOS和APP的表达，均为早期组的保护作用优于晚期组。两者之间存在交互作用的指标有：除游泳速度的行为学指标，皮层的ChAT活性和海马的NMDA-R含量、nNOS和APP的表达以及皮层和海马的突触计数资料。结果为早期低剂量HRT组保护作用最强或早期低剂量与高剂量HRT组结果相似。结论：在绝经早期HRT的应用可以改善OVX引起的空间学习记忆能力的下降，提高皮层及海马ChAT活性来改善胆碱能神经系统功能；增加皮层及海马NMDA受体活性来调节兴奋性神经递质的功能；降低海马区MAO活性，调整胺类神经递质代谢；保护神经元细胞数量，减少神经细胞变性；调节脑内淀粉样物质代谢，抑制Aβ的表达；调节NMDA-NO信息通路；维持脑血流；增加神经元突触传递等，从而达到保护神经，对认知功能起到正性调节作用。到了绝经晚期HRT的大部分保护作用减弱或消失。中枢神经系统中不同的神经元、递质和受体对绝经后激素水平下降以及长期的激素替代的反应不同。绝经早期和绝经晚期在补充雌激素之前两组治疗的起点不同。治疗的效果也就不同。对于HRT剂量和时机的选择，建议绝经早期选择低剂量HRT。这些均为进一步临床研究提供理论依据。