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食管癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,具有高发病率、高死亡率和预后差等特点。食管癌严重危害着人类的生命健康及生活质量,其主要治疗原则是手术为主联合化疗、放疗的综合治疗,但由于起病隐匿,早期症状不典型,大部分患者到疾病中晚期才到医院就诊,已失去手术机会,使得化疗成为目前最主要的治疗手段。然而,肿瘤化疗过程中出现的多药耐药性(multidrug resistance,MDR)是导致治疗失败的主要因素,故MDR成为了近年来的研究热点。为了克服MDR这一重大难题,学者们开始致力于研究新的MDR逆转剂,这也是目前肿瘤领域研究的焦点之一。姜黄素(curcumin,Cur)是一种脂溶性酚类色素,毒性低、不良反应小,具有抗炎、抗肿瘤、抗动脉硬化、促进肿瘤细胞凋亡等药理作用。近年来,有研究证实,Cur可以有效逆转多种耐药肿瘤MDR。然而,关于Cur逆转耐药食管癌细胞MDR的研究报道较少,其作用机制尚不清楚。本实验使用小剂量姜黄素联合长春新碱作用于食管癌耐药细胞株Eca-109/VCR,运用多种实验技术,研究Cur对食管癌耐药细胞MDR的逆转作用,并进一步探讨其可能的逆转机制。通过CCK-8法检测不同浓度长春新碱(vincristine,VCR)对食管癌耐药细胞Eca-109/VCR增殖的影响,检测不同浓度Cur对Eca-109/VCR细胞增殖的影响进而选取Cur逆转剂量(20μmol·L-1),并且检测Cur(20μmol·L-1)对Eca-109/VCR细胞多药耐药的逆转作用;FCM法检测Cur(20μmol·L-1)、VCR(2.0mg·L-1)单药或联合用药作用24h后,对Eca-109/VCR细胞凋亡率的影响;ELISA检测各组Eca-109/VCR细胞中P-gp蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR分析各组Eca-109/VCR细胞中Wnt2、β-catenin m RNA的相对表达量;Western blot检测各组Eca-109/VCR细胞中Wnt2、β-catenin、MMP2和HMGB1蛋白的表达水平。结果发现,不同浓度Cur作用于Eca-109/VCR细胞24h后,随着Cur浓度的增加,细胞抑制率逐渐升高,呈剂量依赖性,并选取细胞抑制率(7.61±0.77)%,即小于10%的最大姜黄素浓度(20μmol·L-1)作为逆转剂量;不同浓度VCR单药或与Cur(20μmol·L-1)联合作用24h后,各Cur+VCR组对Eca-109/VCR的抑制率较相应VCR组明显升高(P<0.01),各VCR组与Cur+VCR组的半数抑制浓度(IC50)分别为5.13和1.47μg/m L,逆转倍数为3.49。Cur(20μmol·L-1)和VCR(2.0mg·L-1)单药或联合作用24h后,Cur+VCR组的细胞凋亡率为(18.46±2.38)%,较VCR单药组明显升高(P<0.05);Cur+VCR组的P-gp蛋白含量为194.28±19.46,明显低于VCR单药组(P<0.05);Cur+VCR组Wnt2、β-catenin m RNA的相对表达率分别为(36.41±2.48)%、(27.76±2.8)%,均较VCR单药组明显降低(P均<0.05);Cur+VCR组Wnt2、β-catenin、MMP2、HMGB1蛋白表达分别为0.152±0.014、0.340±0.029、0.099±0.009、0.188±0.010,均较VCR单药组明显降低(P<0.01)。研究结果表明,Cur具有逆转食管癌细胞多药耐药的作用,其作用机制可能与下调Wnt2、β-catenin、P-gp的表达,降低Wnt2/β-catenin经典通路活性以及下调侵袭相关蛋白MMP2、HMGB1有关。Cur的合理运用可能明显提高食管癌患者化疗的疗效,有望为食管癌患者的临床治疗提供新途径。