非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus)又名扶郎花,属菊科扶郎花属,多年生宿根草本观赏植物,非洲菊花朵硕大,花梗挺拔,花色多样,开花周期长,切花观赏期长,具有较高的观赏价值,值得广泛种植。现在国内的非洲菊优良品种主要是通过从国外高价购进种子或种苗来获得,因此有必要利用各种育种方法培育我国自己的优良品种。本项目研究的目的是针对非洲菊的育种方面的难题,利用优良的非洲菊品种的花托﹑嫩叶片﹑茎尖﹑花梗等作为材料,建立非洲菊的高频再生体系及非洲菊的遗传转化体系,并在此基础上进行了农杆菌介导的双抗虫基因的转化,通过PCR及Southern blot检测目的片断是否整合到植株体内,从而为优良品种的培育、改良和快速推广提供物质与技术支持。主要结果如下:1、高效再生体系的建立。本实验得出愈伤组织的诱导是以MS为基本培养基,附加BA10mg/L+NAA0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂粉5.5g/L(以下培养基蔗糖和琼脂粉用量均同)的效果为最佳,然后及时转接到MS+BA2.0 mg/L +NAA1 mg/L +AD(硫酸腺嘌呤)5mg/L+PVP1.0mg/L+Vc1.0mg/L的培养基上诱导芽的分化。增殖培养是以MS+BA2.0 mg/L +NAA0.5 mg/L为佳。生根培养是以1/2MS+IBA0.2 mg/L的培养基为最佳。2、初步建立遗传转化体系。用非洲菊的叶柄基部小组织块作受体材料,预培养2d,在OD值为0.4的农杆菌液中侵染l5min,共培养2d,这样做的结果在后来表现较好,然后叶柄处小组织块转接到含400mg/LCarb和30mg/LKan的MS培养基上。最终得到18株抗性苗。考虑到可能假阳性比率较高,为了在后期减少筛选的工作量而进行了二次抗性筛选得到了8株抗性苗。3、对所获得的转化植株进行PCR检测及Southern Blot鉴定,表明部分转化植株呈PCR阳性,转基因植株中总DNA Southern杂交后有明显的杂交信号,而未转化的再生植株则PCR呈阴性,无Southern杂交信号,说明目的基因已被成功整合到非洲菊的基因组中。