【摘 要】
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目的:
本实验Western blot检测PRXⅢ蛋白在人卵巢癌敏感细胞系及卵巢癌紫杉醇耐药细胞系的表达情况。应用流式细胞分析仪和Western blot测定紫杉醇作用下两种卵巢癌细胞
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目的:
本实验Western blot检测PRXⅢ蛋白在人卵巢癌敏感细胞系及卵巢癌紫杉醇耐药细胞系的表达情况。应用流式细胞分析仪和Western blot测定紫杉醇作用下两种卵巢癌细胞凋亡及PRXⅢ蛋白表达情况,从而探讨PRXⅢ与卵巢癌紫杉醇耐药的关系。
方法:
一、细胞培养
SKOV-3,SKOV-3/TAX,置于含有10%胎牛血清的DEME培养液内,在37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱内培养。每3天更换培养液,细胞长满时以O.25%胰酶消化传代。
二、Western blot
检测PRXⅢ蛋白在人卵巢癌敏感细胞系及卵巢癌紫杉醇类耐药细胞系的表达情况,及紫杉醇作用下卵巢癌细胞中PRXⅢ蛋白的表达情况。
三、流式细胞分析仪
检测紫杉醇作用下SKOV3、SKOV-3/TAX两种细胞凋亡情况,及其之间的差异。
结果
一、PRXⅢ蛋白在卵巢癌敏感细胞系及紫杉醇耐药细胞系的表达情况
卵巢癌紫杉醇耐药细胞PRXⅢ蛋白表达量显著高于卵巢癌敏感细胞系(其蛋白表达均值分别为200±4.24;155±2.83,P<0.05)。
二、紫杉醇作用下卵巢癌紫杉醇耐药细胞与卵巢癌敏感细胞凋亡情况
紫杉醇作用下卵巢癌紫杉醇耐药细胞的凋亡率明显低于卵巢癌敏感细胞系有统计学意义。[凋亡率(2.63±0.21)%;(7.34±0.24)%,P<0.05]
三、紫杉醇作用后两种卵巢癌细胞系PRXⅢ蛋白表达情况
紫杉醇作用下PRXⅢ卵巢癌耐药细胞系的表达要高于卵巢癌敏感细胞系,有统计学意义(其蛋白表达的平均值分别是203±2.83:137.5±2.12,P<0.05)。
结论:
PRXⅢ蛋白在卵巢癌紫杉醇耐药细胞系中表达量明显高于敏感组,在紫杉醇作用下卵巢癌紫杉醇耐药细胞凋亡率明显低于敏感细胞且PRXⅢ表达量明显高于敏感组,提示PRXⅢ可能通过肿瘤细胞内高表达抑制或减少肿瘤细胞凋亡,从而导致肿瘤细胞耐药。
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