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目的前额皮层（PFc）、杏仁核到伏隔核（NAc）的谷氨酸能投射对NAc多巴胺（DA）的释放具有调节作用,但这些环路是否参与海洛因成瘾时奖赏和动机的改变还不清楚。本课题观察激活腹内侧前额皮层（vm PFc）或基底外侧杏仁核（BLA）到伏隔核壳部（NAc shell）通路的代谢型谷氨酸受体2/3（m Glu R2/3）及谷氨酸释放对海洛因成瘾大鼠奖赏和动机的影响,从而为海洛因成瘾的早期干预提供理论依据。方法实验一:首先,大鼠在不同海洛因给药剂量（0.0125,0.025,0.05,0.1mg/injection/kg）下进行连续14 d的自身给药训练;第15天,大鼠腹腔注射m Glu R2/3的激动剂LY379268（0,0.1,0.3,1 mg/kg）,随后固定比率1（FR1）程序下进行海洛因自身给药测试,观察LY379268浓度和海洛因剂量对奖赏的交互作用。其次,另有4组大鼠在固定的海洛因给药剂量下进行连续14 d的训练（0.05mg/injection/kg,下同）;第15天,大鼠腹腔注射LY379268（0,0.1,0.3,1mg/kg）,随后累计比率（PR）程序下观察LY379268对海洛因给药动机的影响。最后,再有4组大鼠进行连续14 d的训练;第15 d,大鼠腹腔注射生理盐水、LY379268（1 mg/kg）、LY341495（1 mg/kg,m Glu R2/3的拮抗剂）或LY379268+LY341495,FR1程序下观察LY379268和LY341495对海洛因奖赏的相互影响。实验二:首先,大鼠进行连续14 d的自身给药训练;第15天,大鼠分别在大脑核团腹侧被盖区（VTA）、伏隔核核部（NAc core）或NAc shell双侧微注射不同浓度的LY379268（0,0.3,1 mg/ml）,每侧0.5μl,随后FR1程序下进行自身给药测试,观察LY379268干预海洛因奖赏的中枢位点。其次,另3组大鼠进行连续14 d训练;第15天,对照组在单侧vm PFc和对侧NAc shell给予生理盐水,其它两组在单侧vm PFc或背内侧前额皮层（dm PFc）注射GABAA+GABAB激动剂的混合液Muscimol+Baclofen（0.06+0.6 nmol/μl,）,在对侧NAc shell均注射LY379268（1 mg/ml）,每侧0.5μl,FR1程序下进行自身给药测试。最后,两组大鼠进行连续14 d的训练;第15天,对照组在单侧BLA和对侧NAc shell给予生理盐水,BLA-NAc shell组在单侧BLA注射Muscimol+Baclofen和对侧NAc shell注射LY379268,每侧0.5μl,FR1程序下进行自身给药测试。实验三:首先,大鼠在单侧vm PFc注射谷氨酸能光遗传病毒或阴性对照（NC）病毒,术后进行连续14 d的自身给药训练。第15天,大鼠在FR1程序下测试vm PFc谷氨酸能神经元激活对奖赏的影响。NC组和vm PFc激活组测试时均用波长470 nm、直流电频率和功率5 m W的蓝光刺激,每次持续1 h,间隔1 h。其次,大鼠在单侧BLA注射上述病毒并在同侧NAc shell埋置16通道电极。第15天,大鼠在FR1程序下测试BLA谷氨酸能神经元激活对奖赏的影响或在PR程序下测试对动机的影响。NC组和BLA激活组测试时均用波长470 nm、频率25 HZ和功率5 m W的蓝光刺激,每次持续1 h,间隔1 h,同时在NAc shell神经元末梢记录刺激前后放电的变化。实验四:大鼠单侧NAc shell注射狂犬病毒（RV）。7 d后,大鼠灌流取脑,冰冻切片后显微镜下观察神经元逆向示踪的表达。结果实验一:首先,双因素方差分析发现LY379268浓度(F（3,106）=3.485,p<0.05)和海洛因剂量(F（3,106）=3.045,p<0.05)存在统计学差异,但两者没有交互作用（p>0.05）。海洛因剂量为0.5 mg/injection/kg时LY379268对奖赏的抑制效应最明显,0.1和0.3 mg/kg LY379268组较对照组的注射针数均明显减少（p<0.05）,1 mg/kg LY379268组较对照组极明显减少（p<0.01）。其次,单因素方差分析发现,PR程序下各组完成最后一针海洛因注射所需有效鼻触数(F（3,25）=3.492,p<0.05)和海洛因注射针数(F（3,25）=5.373,p<0.01)均有统计学差异。与对照组相比,1 mg/kg LY379268组完成最后一针的有效鼻触数和注射针数均明显减少（p<0.05和p<0.01）。最后,单因素方差分析发现,各组有效鼻触数(F（3,27）=4.084,p<0.05)和海洛因注射针数(F（3,27）=4.203,p<0.05)均有统计学差异。与对照组相比,LY379268组的有效鼻触数和注射针数均明显减少（p<0.05）;与LY379268组相比,LY341495+LY379268组的有效鼻触数和注射针数均明显增加（p<0.05）。实验二:首先,单因素方差分析发现VTA各组有效鼻触数和注射针数均没有统计学差异（p>0.05）;NAc core各组有效鼻触数(F（2,15）=8.26,p<0.05)和注射针数(F（2,15）=6.16,p<0.05)均具有统计学差异,1 mg/kg LY379268组的有效鼻触数和注射针数较对照组均明显减少（p<0.05）;NAc shell各组有效鼻触数(F（2,16）=12.14,p<0.01)和注射针数(F（2,16）=11.70,p<0.01)均具有统计学差异,与对照组相比,0.3 mg/kg LY379268组的有效鼻触数和注射针数均明显减少（p<0.05）,1 mg/kg LY379268组的有效鼻触数和注射针数均极明显的减少（p<0.01）。其次,单因素方差分析发现各组有效鼻触数(F（2,15）=6.25,p<0.05)和注射针数(F（2,15）=5.19,p<0.05)均有统计学差异。vm PFc-NAc shell组的有效鼻触数和注射针数较对照组均明显减少（p<0.05）。最后,独立样本T检验发现,与对照组相比,BLA-NAc shell组的有效鼻触数和注射针数均没有明显差异（p>0.05）。实验三:首先,单因素方差分析表明FR1程序下vm PFc各组的有效鼻触数(F（2,15）=5.14,p<0.05)、无效鼻触数(F（2,15）=5.32,p<0.05)和注射针数(F（2,15）=5.18,p<0.05)均有统计学差异。与对照组相比,vm PFc激活组的有效鼻触数和注射针数明显减少（p<0.05）,无效鼻触数明显增加（p<0.05）;与NC组相比,vm PFc激活组的有效鼻触数呈减少趋势（p=0.063）。其次,单因素方差分析表明,FR1程序下BLA各组有效鼻触数接近统计学差异（p=0.058）,而注射针数没有统计学差异（p>0.05）。与NC组相比,BLA激活组的有效鼻触数有减少趋势（p=0.053）。最后,单因素方差分析表明,PR程序下BLA各组完成最后一针的有效鼻触数和注射针数均没有统计学差异（p>0.05）。BLA激活组光刺激时NAc shell末梢记录到明显的神经元放电。实验四:显微镜下观察到vm PFc和BLA均有神经元胞体或轴突投射到NAc shell,且表达位置与核团注射LY379268或光遗传病毒的位点一致。结论LY379268能明显降低海洛因成瘾大鼠的奖赏效应和给药动机,且主要的中枢位点位于NAc shell;进一步实验发现从vm PFc到NAc shell的m Glu R2/3激活参与了对海洛因奖赏和动机的抑制作用。光遗传学研究发现刺激vm PFc谷氨酸能神经元减少大鼠有效鼻触的同时增加了无效鼻触,可能是vm PFc到NAc shell谷氨酸能投射的激活干扰了大鼠奖赏记忆的提取;激活BLA到NAc shell的m Glu R2/3和谷氨酸能投射对海洛因成瘾大鼠的奖赏和动机均没有影响。