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目的:研究异丙酚对内毒素(LPS)性急性肺损伤(ALI)大鼠中性粒细胞凋亡及NF-κB活性的影响。
方法:健康清洁级雄性SD大鼠60只,3月龄,体重250~350 g,随机分为5组(n=12):对照组(C组)、ALI模型组和不同剂量异丙酚处理组(P1、P2、P3组)。AL1模型组经股静脉注射LPS5mg/kg;P1、P2、P3组经股静脉注射LPS5mg/kg后立即分别静脉输注异丙酚5 mg·kg-1·h-1、10 mg·kg-1·h-1和15 mg·kg-1·h-1,持续输注2h;C组经股静脉注射10ml生理盐水。液体微泵输注2 h后,采集颈动脉血样、行血气分析,放血处死所有大鼠,行病理切片、肺组织病理学评分,测定湿干重比;通过密度梯度离心法分离中性粒细胞(PMN):流式细胞仪检测PMN凋亡率变化,Westernblot测定中性粒细胞NF-κB的活性。
结果:1.大鼠右下肺肺组织HE染色400倍光镜下病理结果显示C组肺泡结构正常;ALI模型组肺泡壁增厚、肺间质水肿、肺泡腔内有大量中性粒细胞浸润,提示ALI模型制备成功;P1组~P3组肺组织病理损伤较ALI模型组明显减轻。与对照组比较,ALI模型组肺部损伤严重病理学评分(IQA)和湿干重比(W/D)增加有统计学意义(P<0.05);与ALI模型组比较,异丙酚处理组肺损伤程度减轻IQA和W/D降低有统计学意义(P<0.05)。
2.血气分析结果显示,与对照组比较,ALI模型组血气结果PaO2和氧合指数降低有统计学意义(P<0.05),提示ALI组模型制备成功;与ALI模型组比较,异丙酚处理组血气结果PaO2和氧合指数增加有统计学意义(P<0.05)。
3.流式细胞术及Western blot结果显示,与C组比较,ALI模型组PMN的凋亡率降低有统计学意义(P<0.05),磷酸化NF-κB p65表达上调(P<0.05);与ALI模型组比较,异丙酚处理组的凋亡率增加有统计学意义(P<0.05),异丙酚处理组磷酸化NF-κB p65表达下调差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:异丙酚减轻LPS诱导的大鼠ALI,可能与促进中性粒细胞的凋亡和抑制外周血中性粒细胞NF-κB的活性有关。