【摘 要】
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猪繁殖与呼吸综合征在全球广泛流行,严重影响养猪业的发展,目前对于该病的防护主要依靠疫苗免疫,但由于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)易发生突变,并且存在抗体依赖性增强作用(A
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猪繁殖与呼吸综合征在全球广泛流行,严重影响养猪业的发展,目前对于该病的防护主要依靠疫苗免疫,但由于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)易发生突变,并且存在抗体依赖性增强作用(ADE),临床应用效果并不理想。在我国使用中药抗病毒具有悠久的历史,从中药中筛选出了具有抗病毒作用的甘草酸、苦参碱,将其组成复方,进行体外、体内试验,探讨其抗PRRSV的效果。本试验主要分为以下三个部分。试验一:苦参碱与甘草酸复方体外对PRRSV作用研究。按质量比将甘草酸与苦参碱配成:1:1、1:2、1:3、1:4、2:1、3:1、4:1共7种不同的复方,进行体外抗病毒试验。结果表明:各复方均能够抑制PRRSV导致的细胞病变,对PRRSV均有治疗与直接杀灭作用,且效果优于单体,但无预防作用。以苦参碱:甘草酸按质量1:4配比时在0.25mg/m L时效果最佳,在直接杀灭与治疗作用试验中,其抑制率分别是83.25%和76.95%,治疗指数为12.696。确定苦参碱:甘草酸1:4为最优复方,继续探讨药物抗PRRSV作用。发现药物介入病毒感染细胞的时间越早,效果越好,当细胞感染病毒超过24h后再用药,药物对病毒的复制没有抑制作用(P>0.05)。最优复方能使病毒的TCID50下降,在安全浓度范围内与药物浓度成正相关。试验二:苦参碱与甘草酸复方在猪体内对PRRSV作用研究。试验分为对照组与对照同居感染组、用药组与用药同居感染组。结果显示,使用PRRSV攻毒后各组猪只都出现发病症状,发病率均为100%,各组间的死亡率无显著性差异(P>0.05)。在体温、抗体试验中,对照组与用药组无明显差异(P>0.05),两同居组之间也无显著性差异(P>0.05)。从临床症状看用药组在用药后表现为急性死亡,攻毒第8d死亡率已达75%,此时对照组均未出现死亡。结果表明该复方药加快了感染PRRSV的试验猪的死亡速度,在体内没有表现出有效的抗PRRSV作用。试验三:苦参碱与甘草酸复方在猪体内对PRRSV活疫苗免疫作用的研究。试验设免疫用药组与免疫对照组、非免疫用药组与非免疫对照组4组。结果显示,使用PRRSV攻毒,免疫PRRSV活疫苗102.0TCID50的免疫对照组和免疫用药组的发病率分别为0%和20%,均未出现死亡现象,无显著性差异(P>0.05)。而未免疫直接攻毒的非免疫对照组和非免疫用药组,发病率均为100%,死亡率达到60%和80%,无显著性差异(P>0.05)。未免疫PRRSV活苗的猪发病率和死亡率显著高于免疫组(P<0.05)。试验期间各用药组与其对照组在体重、体温、PRRSV N蛋白抗体方面均差异不显著(P>0.05)。免疫期间非免疫各组的细胞因子水平之间无显著性差异,免疫用药组IL-6、IL-8、IFN-α、TNF-α炎性因子水平在免疫14d时显著高于免疫对照组(P<0.05),攻毒后非免疫用药组细胞因子水平在多个时间点显著高于非免疫对照组(P<0.05);非免疫组细胞因子水平在攻毒后多个时间点高于免疫组。结果表明,苦参碱和甘草酸复方在猪群感染PRRSV强毒株后会增强其炎性反应,促使机体产生过量的炎性因子,造成机体损伤,治疗效果不理想,其与PRRSV减毒活疫苗在猪体内没有表现出协同增强作用。
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