【摘 要】
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目的:构建CD44新剪接变异体siRNA表达载体质粒,获得质粒稳定转染的人鼻咽癌5-8F细胞系,为研究CD44新剪接变异体在鼻咽癌中的功能提供实验基础。方法:将合成的寡核苷酸链退火
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目的:构建CD44新剪接变异体siRNA表达载体质粒,获得质粒稳定转染的人鼻咽癌5-8F细胞系,为研究CD44新剪接变异体在鼻咽癌中的功能提供实验基础。方法:将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入pGenesil-1.3-kan/Neo表达载体,并测序鉴定。脂质体法把重组质粒转染至5-8F细胞,通过G418筛选,滤纸法获取单克隆细胞,建立稳定转染的5-8F细胞系。结果:构建了新CD44剪接变异体siRNA重组真核表达载体,获得了G418筛选后的单克隆转染5-8细胞株。结论:成功构建了新CD44剪接变异体siRNA真核表达载体,成功转染到5-8F细胞内,并获得了单克隆细胞株。
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