热休克蛋白70联合IL-2对肝癌治疗作用的实验研究

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目的 研究肿瘤来源的热休克蛋白70对肝癌小鼠的治疗作用,对比研究肿瘤来源的热休克蛋白70与多年实验与临床研究证实疗效的白细胞介素-2对肝癌小鼠的治疗作用,评价肿瘤来源的热休克蛋白70对小鼠肝癌的疗效;研究热休克蛋白70、IL-2等恶性肿瘤治疗方法联合应用肝癌小鼠的治疗作用。为应用肿瘤来源的热休克蛋白70治疗人类恶性肿瘤提供参考依据。 方法 用液相色谱法纯化小鼠肿瘤细胞株中的热休克蛋白70。对纯化产物用SDS PAGE及Western-blot进行定性分析,再用毛细管电泳鉴定其纯度。通过动物实验观察HSP70、IL-2单独及联合应用的抗肿瘤作用。 结果 应用5μgHSP70能延缓肝癌小鼠的肿瘤发展,肿瘤直径与对照组比较差异显著(P<0.05),51μgHSP70能延长肝癌小鼠的生存期限,提高生存率,该组小鼠平均生存期28.7±4.5d,与对照组(18.5±3.9d)相比差异显著(P<0.05),但这两组均无一例长期存活;而10μgHSP70治疗组的小鼠肿瘤生长延缓,肿瘤直径与对照组及5μgHSP70组比较均有统计学差异(P<0.001,P<0.025),该组40%小鼠肿瘤完全消退,生存期为>59.2±29.6d,40%获长期生存(>90d),与对照组相比,差异具显著性(P<0.01)。单独应用不同剂量的IL-2能延缓肿瘤发展,与对照组比较差异显著(P<0.05,P<0.025),延长小鼠的生存期限,IL-250,000u组平均生存期为(26.2±8.4)天,IL-2100,000u组平均生存期为O6.6 d u.o)天,其中IL一二1皿,以DU组平均生存期与对照组比较差异显著仔<o.05,X而*So o* po组可使的物肝癌小鼠的肿瘤最终全部消退,生存期最长者>90d,与IL-2相比较差异显著沙<o.05人10呛H团司0与5万u见一2联合应用组可使物院肝癌小鼠的肿瘤完全消退,平均生存期(>61.2。刀.1川,与对照组相比差异十分显著厂<0.01人与儿一2 50,000 <组比较差异显著河<o.05人10卜召HSo 0与ic万U IL-2联合应用组可使60%肝癌小鼠的肿瘤完全消退,平均生存期(>7o.8上历.5 *,与对照组相比差异十分显著瞩<0刀1人与L-21m,删U组比较差异显著河<0.05人不同剂量的IL-2及HSpoo对肝癌鼠均有治疗作用,其中IL-2 ic万U及鹏N0 10po效果最佳,IL-2 5万u及鹏N05哈有部分治疗作用,ic万U的IL-2与sw*叨0治疗效果相当。而HSP70 10po与不同剂量的IL-2比较均有显著差异河<0.05,P<o.025人对肝癌鼠腹水出现率方面:23d时,对照组为1血动,5卜 *SP7 0组为姐助,5万UIL-2组为60畅,ic万UIL-2组为20呢,术后应用HSP7 osng组为”防,其余均为0。各治疗组与对照组比较差异均显著瞩<0刀5,人 结 论 肿瘤来源的HSP70对肝癌小鼠具有明确的治疗作用,使肝癌小鼠生长延缓甚至肿瘤消失并明显延长肝癌小鼠HSP70生存期限,免疫具有肿瘤特异性,为特异性免疫治疗,其疗效明显优于作为非特异性免疫治疗的IL-2,合适剂量的Hgno与合适剂量的IL一二联合应用,对肝癌小鼠有明显的治疗作用,可明显抑制肿瘤进展,减少腹水发生,提高生存率,甚至达到无瘤生存。本研究对于研究热休克蛋白单独及联合应用IL-2治疗人类恶性肿瘤有较大的参考价值。
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