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第一部分miR-137作用于MITF下调AKT磷酸化增强多发性骨髓瘤细胞的地塞米松敏感性目的：本实验以人多发性骨髓瘤(MM)患者及非MM患者的骨髓单个核CD138+细胞,人多发性骨髓瘤RPMI8226和U266细胞为研究对象,观察miR-137在MM细胞内的表达情况及其对MM细胞地塞米松敏感性的影响,并进一步探讨其分子机制。方法：用磁珠分选法分选MM患者及非MM患者的骨髓单个核CD138+细胞；Taqman real-time PCR法检测细胞内miR-137的表达情况；双荧光素酶报告基因法对miR-137的靶点进行验证；慢病毒转染法转染MITF-shRNA以及过表达miR-137, MITF; Real-time PCR法检测MITF, c-MET, P53的mRNA表达变化；Western blot或免疫荧光法检测MITF, c-MET, AKT, P53, p-AKT及其下游磷酸化蛋白的表达；MTT法和流式细胞术凋亡检测分析转染前后MM细胞的地塞米松敏感性。结果：miR-137在RPMI8226和U266细胞内未检测到表达,在MM患者骨髓单个核CD138+细胞的表达显著低于非MM患者骨髓单个核CD138+细胞；双荧光素酶报告基因实验提示MITF是miR-137的一个靶点；与转染对照载体相比,转染miR-137或MITF-shRNA后,MITF, c-MET, p-AKT及其下游磷酸化底物蛋白表达明显下调,AKT的表达无明显变化,P53表达明显上调,同时,地塞米松对MM细胞的36h抑制率及其诱导的MM细胞凋亡率均明显上调；在转染了miR-137的MM细胞内过表达MITF,可以逆转上述变化。结论：miR-137可以引起MM细胞内MITF及其下游c-MET的表达下调,进而使AKT的磷酸化水平下调,从而提高了MM细胞对地塞米松的敏感性。第二部分miR-137作用于MTTF下调AKT磷酸化提高多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的自噬活性目的：本实验以人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞为研究对象,观察miR-137在RPMI8226细胞内的表达情况及其对RPMI8226细胞自噬的影响,并进一步探讨其分子机制。方法：用慢病毒转染法转染MITF-shRNA以及过表达miR-137, MITF; Western blot法检测MITF, c-MET, AKT, p-AKT, p-mTOR, p-Beclin1, LC3II的表达；免疫共沉淀(co-IP)法检测p-Beclin1与14-3-3蛋白和Vimentin蛋白的结合。结果：转染miR-137或MITF-shRNA后,AKT的表达无明显变化,MITF, c-MET, p-AKT, p-mTOR, p-Beclin1表达明显下调；转染miR-137或MITF-shRNA后,LC3Ⅱ在基础情况下有少量增多,在饥饿诱导时显著增多；在转染了miR-137的MM细胞内过表达MITF,可以逆转miR-137的上述生物学效应。结论：过表达miR-137可以引起MM细胞内MITF及其下游c-MET的表达下调,进而使AKT的磷酸化水平下调,从而促进MM细胞的自噬。