【摘 要】
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萜类化合物是一种在食品、医药、化工等领域有着重要价值的天然产物,是由异戊二烯单元重复连接组成且含有不同数量碳原子的物质,种类繁多,数量庞大。其中,长叶烯是由3个异戊二烯组成的三环倍半萜,是名贵香料和高级香水的主要成分,同时它也是新型生物燃料,可作为航空煤油的理想替代品。大肠杆菌凭借其简单的遗传背景和成熟的操作技术成为优选的微生物宿主,其内源MEP途径也为萜类物质的合成提供了良好的分子基础,为实现萜
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萜类化合物是一种在食品、医药、化工等领域有着重要价值的天然产物,是由异戊二烯单元重复连接组成且含有不同数量碳原子的物质,种类繁多,数量庞大。其中,长叶烯是由3个异戊二烯组成的三环倍半萜,是名贵香料和高级香水的主要成分,同时它也是新型生物燃料,可作为航空煤油的理想替代品。大肠杆菌凭借其简单的遗传背景和成熟的操作技术成为优选的微生物宿主,其内源MEP途径也为萜类物质的合成提供了良好的分子基础,为实现萜类化合物多样化的生物合成提供了可能。
本研究以大肠杆菌BL21(DE3)为细胞工厂,通过引入外源长叶烯合酶基因(lgfs)并对其内源MEP途径中关键酶基因dxs、dxr、idi及ispA进行过表达,得到中心代谢途径优化的、具有合成长叶烯能力的重组大肠杆菌。为了增强合成长叶烯的前体物供应量,本研究引入异源MVA途径,使其与优化的MEP途径协同作用,以期提高目标产物产量;同时分析了过表达基因相对表达水平及中间代谢物MVA、IPP/DMAPP、FPP的积累对细胞生长和产物合成的影响。另外,本研究对重组大肠杆菌的发酵条件进行了优化,筛选出了TB培养基、诱导剂添加时间为接种后0h、诱导剂添加浓度0.1mM以及诱导温度30℃的最佳组合,实现了摇瓶产量3.85mg/L的突破。最后,通过多序列比对和同源建模对酶活性中心进行了研究,预测出残基331-336位点为LgfS的活性区域;结合本研究的随机突变实验结果,分析了突变位点对长叶烯合酶蛋白结构及酶活力的影响。
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目的: 岭南灸法起源己久,带有鲜明的地域性特征,是岭南医学史上的一个重要分支。岭南灸法得以不断地传承与发展,离不开历代医家们的突出贡献,他们不仅注重在临床上用灸治病,还把有关灸法的内容编著成书,为后世研究灸法提供了宝贵的材料。然而,从古至今,岭南灸法相关的文献资料在各医家的著作中虽有所涉及,但分布较为零散,未能体现出其独有的治疗特色。因此,通过单独整理与分析岭南灸法文献,探讨其学术发展源流,深入
目的: 探讨早期创伤经历(ELS)对成年大鼠下丘脑.垂体一肾上腺(HPA)轴的编程效应以及创伤后应激障碍(PTSD)易感性的影响,同时观察补肾填精方药龟鹿二仙胶(GLEXJ)早期用药的干预作用及其可能作用机制。 方法: (1)采用单一延长应激(SPS)为应激原的方法建立ELS大鼠模型。 (2)采用旷场实验、高架十字迷宫实验、场景恐惧记忆实验检测大鼠的行为学表现。 (3)采用ELISA法分
背景:高磷血症是慢性肾脏病(CKD)常见的不良反应之一。高磷血症是冠状动脉疾病和其他血管钙化的危险因素,可导致继发性甲状旁腺功能亢进,加速肾功能衰竭,增加CKD患者的死亡率。目前临床上降低高磷血症的主要方法有饮食调整、增加透析强度、正确使用降磷药物等。既往使用的降磷药物多通过结合肠道中的磷而增加磷的排泄,但临床实践证明存在诸多不良反应,而新型的磷结合剂价格昂贵,缺乏长期的疗效及安全性研究。祖国医学
目的:中医学里的“阴”有着非常广泛的含义,凡是功能上发挥着滋润、宁静、抑制阳热等效果的物质均属于阴的范畴。“阴”是中医学最核心也最基本的概念之一,其对应生命现象的科学阐述具有重大意义。在阴虚时机体会出现多系统的功能变化,按中医理论,即阴虚导致内热,但何种机制功能不足导致尚不明确。本研究旨在验证假说以糖胺聚糖为主要成分的亲水性物质的含量及其功能上的变化是阴虚证发生过程中重要的病理生理变化基础,可能是
目的:近年来,2型糖尿病、脑血管疾病、痴呆症逐渐成为全球主要的公共卫生及社会问题。深入探讨2型糖尿病、脑血管疾病与痴呆症的关系并且积极寻求经济有效的防控措施具有重要的公共卫生学意义。本研究是基于瑞典全国双生子人群的随访资料,(1)描述1998-2002年至2016年期间脑血管疾病、痴呆症累积发病率和发病密度,并且按照联合国公布的瑞典标准人口分别计算脑血管疾病和痴呆症的标化发病率及发病密度;(2)探
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