沙门氏菌是一种分布极广的病原菌,通过污染食品给人类生命健康造成严重的威胁。沙门氏菌的传统检测方法操作复杂,检测周期长。常见的快速检测方法主要有分子生物学方法和免疫学方法,分子生物学方法需要专业的技术支撑,检测成本较高,难以满足大范围筛查沙门氏菌的需要;免疫学方法以免疫层析方法学应用最广泛,该方法学一般采用荧光素或者胶体金进行标记,两者均易受环境干扰,且灵敏度不高,胶体金灵敏度数量级仅在106～107 cfu/mL。基于此,本课题借助南京诺唯赞医疗科技有限公司的量子点实验平台提供的原材料和实验条件,研发出一种新型快速检测食品中沙门氏菌含量的检测试剂盒。本试剂盒采用新型水溶性量子点代替传统的示踪物质,具有“永不淬灭”,稳定性优良,灵敏度高的优点。本文阐述了沙门氏菌量子点荧光免疫试剂盒的开发以及优化过程,并且评估了试剂盒的基本性能,并对肉类、禽蛋类食品进行检测。主要研究成果如下:1、选用抗沙门氏菌O抗原的单克隆抗体用量子点进行标记,具有良好的特异性和灵敏度。2、检测试剂盒的工艺优化主要优化了质控线的最佳包被浓度为1.0 mg/mL、检测线的最佳包被浓度为2.0 mg/mL。在标记物垫的优化制备过程中,确定了量子点稀释液的最佳稀释比例为1:10,并且添加4%的蔗糖和0.5%的BSA作为最优条件。在样品垫封闭液中确定的最优Casein和蔗糖添加量分别为1%和5%。3、本试剂盒的最低检测限为1.0×103 cfu/mL,且可准确检测的线性范围在1.0×103 cfu/mL～1.0×108 cfu/mL。本试剂盒的精密性和特异性良好,重复性检测CV值均小于10%,与其他的致病菌没有明显的交叉反应,最后对试剂盒进行37℃加速稳定性考察,以4℃作为对照组在21天内进行连续监测,试剂稳定性变幅不超过15%,其稳定性优良。4、通过人工污染实验以及对南京地区超市和菜市场随机315份食品样品进行沙门氏菌的检测,最低灵敏度可达1.0×103 cfu/mL,检测结果准确可靠。