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植物在进化过程中,能够调控体内与胁迫相关的信号机制来抵御外界的危害。而SOS信号通路的激活是在盐胁迫条件下促使Na+外排和在细胞水平控制离子平衡的关键机制之一。SOS1是质膜Na+/H+交换蛋白,拟南芥At SOS1能够被At SOS3/SOS2蛋白激酶复合体调控,而不能被At SOS2调控。酵母中的功能验证表明小麦TaSOS3/SOS2复合体和单独的TaSOS2都能够调控TaSOS1,且单独TaSOS2调控TaSOS1的位点为△1126S1128S,而复合体调控位点与其不同。酵母双杂交系统对TaSOS1缺失突变体和At SOS3/SOS2复合体互作分析表明,At SOS3/SOS2调控TaSOS1的位点在△987-△1122之间。为进一步研究在拟南芥中复合体调控TaSOS1的位点,本研究通过缺失突变和定点突变的方法扩增了小麦全长基因TaSOS1和突变基因TaSOS1△1132、TaSOS1△1126A1128D、TaSOS1△1122和TaSOS1△987,构建植物表达载体,并借助其在拟南芥的功能,进行SOS3/SOS2复合体调控TaSOS1位点的鉴定。主要研究结果如下:1.对转化突变基因TaSOS1△1132的拟南芥进行耐盐性分析,转化TaSOS1△1132突变基因拟南芥的耐盐性与全长TaSOS1的耐盐性相同,都显著高于野生型。表明TaSOS1△1132仍具有TaSOS1的耐盐功能,能够调控拟南芥内源的SOS3/SOS2复合体,说明SOS3/SOS2复合体与TaSOS1的调控位点在氨基酸残基△1132之前。2.转化了TaSOS1△1126A1128D突变基因拟南芥,耐盐性分析结果发现,转化突变基因TaSOS1△1126A1128D拟南芥的耐盐性明显高于野生型,与转化全长TaSOS1拟南芥耐盐性没有差异。表明TaSOS1△1126A1128D和全长TaSOS1一样,能够与拟南芥内源的SOS3/SOS2复合体结合,证明了TaSOS1与复合体SOS3/SOS2的调控位点不是△1126S1128S。3.转化突变基因TaSOS1△987拟南芥的耐盐性分析表明,转化突变基因TaSOS1△987拟南芥的耐盐性与野生型没有差异,明显低于转化全长TaSOS1拟南芥的耐盐性。表明TaSOS1△987失去了全长基因耐盐的特性,且不能调控拟南芥内源SOS3/SOS2复合体,说明SOS3/SOS2复合体调控TaSOS1的位点在△987之后。4.将转化TaSOS1△1122突变基因的拟南芥进行了耐盐性、侧根数、出苗率和根尖分生区的Na+及K+流速的测定分析,结果都表明,转化TaSOS1△1122突变基因拟南芥的功能与全长基因相同,并且明显好于野生型。说明TaSOS1△1122和全长TaSOS1具有相同的功能,能够调控拟南芥内源SOS3/SOS2复合体,且调控TaSOS1的位点就是△1122或在△1122之前。本实验构建TaSOS1全长基因及其突变基因的植物表达载体,利用农杆菌侵染花序的方法转化拟南芥后,通过它们在拟南芥中的表现状态,推测它们能否与拟南芥内源复合体SOS3/SOS2结合,从而鉴定复合体SOS3/SOS2调控TaSOS1的位点。实验结果最终确定复合体SOS3/SOS2调控TaSOS1位点不是△1126S1128S,而是在氨基酸残基△987-△1122之间。