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洛美沙星(Lomefloxacin,LOM)是一种人工合成的第三代属于喹诺酮类的抗菌药,由于其广谱且高效的杀菌作用,通常被用于治疗细菌和支原体感染。然而,LOM的滥用会导致细菌耐药性增强,残留在食品中的LOM可经过食物链进入人体,危害人类健康。在2015年颁布的第2292号公告中,我国农业部已经明确提出禁止LOM等相关制剂用于动物性食品中。因此,建立一种简便和快速的方法检测食品中残留的LOM尤为重要。免疫层析试纸条由于操作简单、检测快速、环保安全和特异性强等优点,因此得以普遍地应用在医学检验和食品的快速检测方面。在免疫层析试纸条的标记物中,胶体金仍然是使用最为广泛的标记物之一,而花状胶体金(金花)因其独特的刺突结构而具有较强的局域表面等离子体共振效应,同时,金花因具有更大的比表面积而能结合更多的抗体,从而可以有效提高检测灵敏度。本研究以金花作为检测标记物,经过系统研究,建立了灵敏度高的金花免疫层析方法快速定量地检测牛奶中LOM的含量,同时进行了 LOM金花免疫层析试纸条的产业化工厂设计。首先,本研究设计制备抗LOM单克隆抗体(单抗)。以盐酸洛美沙星为原料,通过EDC/NHS碳二亚胺法制备了 LOM-BSA和LOM-OVA完全抗原,利用紫外分光光度计表征了免疫原LOM-BSA和包被原LOM-OVA,以评价抗原制备效果。使用LOM-BSA免疫实验小鼠,通过酶联免疫吸附法检测免疫小鼠的抗血清效价,实验从小鼠第三次免疫开始进行监控。冲击免疫选择在对小鼠的第五次免疫后实行,随后进行细胞融合。经过培养、筛选和亚克隆等连续的操作,以期得到抗LOM的单抗。其次,建立了定量检测LOM的金花免疫层析方法。研究结果表明,LOM抗体标记金花的最佳标记pH是6,抗体的最佳标记量是4 μg/mL,检测时间是13 min。在PBS溶液中检测LOM,得到的线性回归方程是:y=-0.321g(x)+0.255(R2=0.9848),线性范围为0.4-4 ng/mL,IC50为0.1715ng/mL,LOD为0.0117 ng/mL。牛奶中检测LOM的标准曲线为y=-0.476lg(x)+0.2644(R2=0.9861),线性范围为 0.2-2 ng/mL,IC50 为 0.3199 ng/mL,LOD 为 0.0528 ng/mL。本方法的批内加标回收率是94.2%-105.3%,变异系数是2.69%-10.60%;批间加标回收率是96.7%-105.0%,变异系数是2.26%-6.90%。所建立的方法实现了对LOM的高灵敏检测,对于有效监控食品中LOM的使用具有重要意义。最后,为了将LOM金花免疫层析技术实现产业化,设计了 LOM免疫层析试纸条的生产工厂,其产品可应用于食品安全快速检测行业,从而保障食品质量与安全。本着合理、经济、高效,并符合国家及行业标准的原则,设计内容包括厂址选择、工艺部分、建筑部分设计、公用系统及安全卫生和环保等方面,并提供了工艺流程图和工厂总平面布置图等。本文从实验原料开始以期制备抗LOM单克隆抗体及LOM金花免疫层析试纸条,最后实现试纸条的产业化,期望可以应用于农产品或食品的实际检测中,为食品安全保驾护航。