芍药汤经TLR4/NF-κB调控湿热蕴结型溃疡性结肠炎大鼠IRAK1、TRAF6及IL8的机制研究

来源 :甘肃中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zzh19860525anan
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目的随着溃疡性结肠炎发病率逐年提高,寻找到一种有效的治疗方法极为迫切,通过查阅文献,选取具有清热利湿、调气和血功效的芍药汤,观察其对湿热蕴结型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中IRAK-1、TRAF-6、IL-8的影响,探究TLR4/NF-κB信号通路与湿热蕴结型溃疡性结肠炎的关系以及芍药汤对此通路的影响。方法采用高脂高糖辛辣饮食加免疫复合法+TNBS结合乙醇的方法复制湿热蕴结型UC大鼠,随机分为空白组、模型组、芍药汤高、中、低剂量组、柳氮磺吡啶组,每组10只雌雄各半,用药干预后第21天处死,取大鼠结肠病变部位组织,采用荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测m RNA、蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测蛋白表达,苏伊红-木精(HE)染色法观察病理切片,检测结肠组织中IRAK-1、TRAF-6以及IL-8m RNA以及蛋白表达。并分析大鼠疾病活动指数、大鼠结肠组织黏膜损伤、病理评分。结果1.活动及状态通过对大鼠的一般形态学观察,各治疗组症状均得到改善芍药汤高剂量组、柳氮磺吡啶组大鼠症状改善最为明显。芍药汤高剂量组与SASP组症状缓解程度相当。DAI评分具有统计学意义(P<0.05)。从大鼠结肠组织CMDI评分来看,与空白组比较,模型组及各治疗组CMDI评分显著提高(P<0.05),经过芍药汤干预后各治疗组CMDI评分均较模型组显著下降(P<0.05),其中以高剂量组最为明显。2.结肠组织病理模型组大鼠结肠组织病变程度严重,深入到肌层,病变严重,各个治疗组不同程度的改变,粘膜开始修复,瘢痕组织形成,可见新生腺体。UC大鼠结肠组织病理组织学评分较之模型组显著下降(p<0.05)。3.结肠组织m RNA及蛋白的表达与空白组比较,模型组IRAK-1、TRAF-6、IL-8蛋白及m RNA表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,芍药汤各剂量组、柳氮磺砒啶组IRAK-1、TRAF-6、IL-8蛋白及m RNA表达均有不同程度的下降,以芍药汤高剂量组及柳氮磺砒啶组最为显著(P<0.05)。结论:1.UC的发生可能与TLR4/NF-κB通路存在一定的相关性,这可能是UC发病的机制。2.芍药汤可抑制湿热蕴结型UC大鼠TLR4/NF-κB信号通路中关键转接分子IRAK-1、TRAF-6表达,从而使TLR4/NF-κB信号通路信号传导抑制,减少炎症因子IL8的释放,从而使湿热蕴结型UC大鼠炎症减轻。
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