壳聚糖薄膜培养对间充质干细胞干性相关基因表达的作用

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目的:比较壳聚糖薄膜培养和常规平板培养对间充质干细胞(MSCs)干性相关基因表达的影响。方法:从脐带中分离MSCs并分别进行壳聚糖薄膜培养和常规平板培养。采用Real-Time RT-PCR 检测 MSCs 干性相关基因 Nanog、Sox2、c-Myc 和 Oct-4 mRNA的表达,Western Blot分析MSCs干性相关基因Nanog、Sox2、c-Myc和Oct-4蛋白的表达。结果:壳聚糖薄膜培养的MSCs能形成类球状体。壳聚糖薄膜培养的MSCs干性相关基因 mRNA 的表达水平(Nanog:3.77±0.25;Sox2:2.32±0.18;c-Myc:2.49±0.21;Oct-4:2.96±0.23)较平板培养组(Nanog:2.50±0.17,P<0.01;Sox2:1.51 ±0.14,P<0.01;c-Myc:1.47±0.13,P<0.01;Oct-4:1.83±0.14,P<0.01)显著增加。与平板培养组MSCs干性相关基因Nanog(1.11±0.12)、Sox2(0.38±0.06)、c-Myc(0.63±0.07)和Oct-4(1.26±0.14)蛋白的表达水平比较,壳聚糖薄膜培养组(Nanog:2.87±0.22,P<0.01;Sox2:0.89±0.08,P<0.01;c-Myc:1.24±0.13,P<0.01;Oct-4:2.71±0.26,P<0.01)显著增高,差异有统计学意义。结论:与常规2D培养的MSCs比较,壳聚糖薄膜培养的MSCs能形成类球状体,其干性相关基因Nanog、Sox2、c-Myc和Oct-4表达显著上调,保持了MSCs的干性。
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