论文部分内容阅读
目的:从“心与小肠相表里”理论探讨脑衰老及补肾健脾开心法延缓脑衰老的机理。并通过动物实验观察亚急性衰老模型大鼠脑皮质衰老、脑与小肠炎症TLR4/NF-κB通路及血清S-100β特异性蛋白、内毒素及炎症相关指标的表达及补肾健脾开心法的干预作用,以探讨补肾健脾开心法改善脑衰老相关炎症的有效性及其作用机制,为中医药延缓衰老提供理论基础与实验依据。方法:文献研究:查阅历代医籍文献中与神志衰退相关的衰老表现,在此基础上梳理出心、脑、小肠等相关脏腑的经典条文,并以脑衰老和衰老导致的小肠功能衰退的典型表现为切入点,梳理其生理功能、病理特点及其相互关系,探讨补肾健脾开心法延缓脑衰老及改善小肠衰老状态的机理,为补肾健脾开心法延缓衰老提供理论依据。实验研究:将100只三月龄健康雄性SD大鼠以D-半乳糖腹腔注射42天制造亚急性衰老模型,另随机选同批次SD大鼠10只,作为空白组腹腔注射等量生理盐水。选取亚急性衰老造模成功大鼠60只,随机分为模型组、维生素E组、补肾组、健脾组、开心组、补肾健脾开心组,每组10只。各组大鼠均按1ml/100g·d灌胃,连续28d。各组取材后,化学比色法检测大鼠脑皮质中SOD与NOS含量,酶联免疫吸附法测定大鼠血清S-100β蛋白、LPS、IL-1β、TNF-α含量,免疫印迹法检测大鼠脑皮质以及回肠TLR4/NF-κB通路的TLR4和NF-κB蛋白表达。结果:1.脑皮质氧化指标SOD、NOS检测结果与空白组相比,模型组SOD含量明显降低(P<0.01)。与模型组比,各治疗组SOD含量均明显升高(P<0.01)。其中维生素E组SOD含量最高,其次是补肾健脾开心组、补肾组,此三组SOD含量与空白组有统计学差异(P<0.05)。开心组和健脾组最低,且与空白组有显著差异(P<0.01)。与空白组相比,模型组NOS含量明显升高(P<0.01)。与模型组比,维生素E组、补肾健脾开心组和健脾组NOS含量均降低(P<0.01,P<0.05),补肾组、开心组与模型组比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。维生素E组含量最低,且与空白组无统计学差异(P>0.05)。其余四组与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。2.脑皮质TLR4/NF-κB通路相关蛋白含量检测结果各组大鼠脑皮质TLR4表达:与空白组相比,模型组明显升高(P<0.01)。与模型组相比,各治疗组大鼠脑皮质中TLR4含量均降低(P<0.01),其中补肾健脾开心组含量最低,与空白组差异无统计学意义(P>0.05)。各中药治疗组均低于维生素E组(P<0.01,P<0.05)。各组大鼠脑皮质NF-κB表达:与空白组相比,模型组的含量明显升高(P<0.01)。与模型组比,各治疗组大鼠脑皮质中NF-κB含量均降低(P<0.01),其中补肾健脾开心组含量最低,与空白组差异无统计学意义(P>0.05)。与维生素E组比,补肾健脾开心组、补肾组较维生素E组含量低(P<0.01)。健脾组、开心组、维生素E组三组差异无统计学意义(P>0.05)。3.回肠TLR4/NF-κB通路相关蛋白含量检测结果各组大鼠回肠TLR4表达:与空白组相比,模型组含量明显上升(P<0.01)。与模型组比,除开心组和补肾组差异不具有统计学意义(P>0.05),其余各治疗组均显著低于模型组(P<0.01)。其中健脾组含量最低,与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠回肠NF-κB表达:与空白组相比,模型组含量升高(P<0.01)。与模型组比,各治疗组大鼠回肠中含量均低于模型组(P<0.01)。其中健脾组含量最低,与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。其余四组间差异无统计学意义(P>0.05)。4.血清S-100β、LPS含量检测结果血清S-100β的含量:与空白组相比,模型组血清中S-100β含量显著升高(P<0.01)。与模型组比,各治疗组血清中S-100β含量均下降(P<0.01),其中开心组与其余治疗组相比含量最低。与维生素E组比,除补肾健脾开心组含量无统计学差异(P>0.05)外,其余各治疗组均有差异(P<0.01,P<0.05)。血清LPS的含量:与空白组相比,模型组血清中LPS含量显著升高(P<0.01)。与模型组比,各治疗组血清中LPS含量均下降(P<0.01),其中补肾健脾开心组血清LPS含量最低。维生素E组和开心组含量无统计学差异(P>0.05)。5.血清IL-β、TNF-α含量检测结果血清IL-1β表达:与空白组相比,模型组IL-1β含量显著升高有显著差异(P<0.01)。与模型组比,各治疗组IL-1β含量明显降低(P<0.01),其中补肾健脾开心组含量最低,差异与空白组无统计学意义(P>0.05),其余四组间差异无统计学意义(P>0.05)。血清TNF-α表达:与空白组相比,模型组TNF-α含量显著升高有显著差异(P<0.01)。与模型组比,各治疗组TNF-α含量明显降低(P<,P<0.05),其中健脾组含量最低,其次是补肾健脾开心组、开心组、维E组,四组间差异无统计学意义(P>0.05)。补肾组含量最高,与维E组有差异(P<0.05)。结论:衰老是脑-肠相关功能衰退并表现为神志影响的综合进程,涉及到心、肾、脾和肠等脏腑,补肾健脾开心法是延缓脑衰老与改善肠功能退化的有效治法。1.补肾健脾开心方可增加模型大鼠脑皮质SOD含量、减少NOS含量,从而增强脑组织的总抗氧化能力,能有效改善亚急性衰老模型大鼠的脑衰老指征。2.补肾健脾开心方可能通过保护肠屏障和血脑屏障的完整性而减少炎症因子进入,从而减轻其对脑内和小肠内TLR4受体特异性的刺激,进而抑制TLR4/NF-κB信号通路激活,阻止衰老所造成的慢性炎症损伤,可能是其延缓脑衰老与改善肠功能退化的可能机制之一。