栀豉悦心片治疗更年期综合征的基础研究

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目的:更年期综合征是妇科常见病、多发病,且近年来有发病年龄提早,发病率上升的趋势。本研究通过观察栀豉悦心片抗抑郁、保护心脏的作用,探讨栀豉悦心片对更年期综合征的作用及机理,为研制开发治疗更年期综合征的中药新药提供理论及实验依据。   方法:   1.栀豉悦心片抗抑郁作用实验研究   1.1 栀豉悦心片对悬尾试验小鼠“失望”和“不动”行为的影响   昆明种小鼠50只,随机分为五组:空白对照组,栀豉悦心片低剂量组(0.9 g/kg),栀豉悦心片中剂量组(1.8g/kg),栀豉悦心片高剂量组(3.6g/kg)及阳性药阿米替林组(14mg/kg)。空白对照组灌服蒸馏水。给药(水)容量为20mL/kg,连续给药20天,进行小鼠开场实验及悬尾实验。   1.1.1 对自主活动的影响:第19天给药30分钟后,参照Soubrie等方法,将小鼠放入开场行为装置中,记录小鼠5分钟内爬格次数。   1.1.2 对不动时间的影响:第20天给药30分钟后,将小鼠尾部用胶布固定于台架边缘,使小鼠头向下悬挂,记录累计6分钟内小鼠不动时间。   1.2 栀豉悦心片对小鼠强迫游泳的影响   随机分为五组:空白对照组,栀豉悦心片低剂量组(0.9g/kg),栀豉悦心片中剂量组(1.8g/kg),栀豉悦心片高剂量组(3.6g/kg)及阳性药阿米替林组(14mg/kg),给药容量20mL/kg,连续给药20天,进行小鼠开场实验及强迫游泳实验。   1.2.1 对自主活动的影响:第19天给药30分钟后,参照Soubrie等[1]方法,将小鼠放入开场行为装置中,记录小鼠5分钟内爬格次数。   1.2.2 对不动时间的影响:参照徐淑云等[2]的方法,将小鼠置入水中游泳2分钟,记录4分钟内累计不动时间。   1.3 栀豉悦心片对大鼠强迫游泳的影响   选取SD大鼠50只,随机分为五组,空白对照组、栀豉悦心片低剂量组(0.7g/kg)、栀豉悦心片中剂量组(1.4g/kg)、栀豉悦心片高剂量组(2.8g/kg)、阳性药阿米替林组(10mg/kg)。空白对照组灌服蒸馏水。给药(水)容量为10mL/kg,连续给药20天,进行开场实验及强迫大鼠游泳实验。   1.3.1 对自主活动的影响:第19天给药30分钟后,参照徐淑云等[3]方法,将大鼠放入开场行为装置中,记录大鼠5分钟内爬格次数。   1.3.2 对不动时间的影响:第20天给药30分钟后,参照徐淑云等[2]的方法,将大鼠放入高40cm、直径18cm的圆柱形玻璃缸中,水深18cm,水温23℃~25℃,记录5分钟内累计不动时间。   1.4 对利血平致小鼠眼睑下垂的影响   选取昆明小鼠60只,随机分为六组,空白对照组、模型对照组、栀豉悦心片低剂量组(0.9g/kg)、栀豉悦心片中剂量组(1.8g/kg)、栀豉悦心片高剂量组(3.6g/kg)、阳性药阿米替林组(14mg/kg)。空白对照组、模型对照组灌服蒸馏水。给药(水)容量为20mL/kg,连续给药14天,末次给药30分钟后,参照徐淑云等[4]的方法分别尾静脉注射利血平注射液(5mg/kg),1小时后观察小鼠眼睑下垂情况,并按标准评分。   1.5 对利血平致小鼠体温降低的影响   选取昆明小鼠60只,随机分为六组,空白对照组、模型对照组、栀豉悦心片低剂量(0.9g/kg)栀豉悦心片中剂量组(1.8g/kg)、栀豉悦心片高剂量组(3.6g/kg)、阳性药阿米替林组(14mg/kg)。空白对照组、模型对照组灌服蒸馏水。给药(水)容量为20mL/kg,连续给药14天,末次给药30分钟后,测量各组小鼠的基础体温,然后分别尾静脉注射利血平注射液2.5mg/kg,分别于注射后1、2、3、4、5、6小时测量小鼠肛温。   2.栀豉悦心片保护心脏作用实验研究   选取昆明小鼠60只,随机分为六组,空白对照组、模型对照组、栀豉悦心片低剂量(0.9g/kg)、栀豉悦心片中剂量组(1.8g/kg)、栀豉悦心片高剂量组(3.6g/kg)、阳性药硝苯吡啶组(12mg/kg)。空白对照组、模型对照组灌服蒸馏水。给药(水)容量为20mL/kg,连续给药7天,末次给药后30分钟,分别腹腔注射垂体后叶素,60分钟后摘眼球取血。   2.1 测定血清超氧物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,血清乳酸脱氢酶(LDH)活性、肌酸磷酸激酶(CK)活性   2.2 测定心肌超氧物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。   结果:   1.栀豉悦心片抗抑郁作用实验研究   1.1 栀豉悦心片对悬尾试验小鼠“失望”和“不动”行为的影响   1.1.1 对自主活动的影响   阳性药阿米替林组5分钟内爬格次数较空白对照组显著减少(P<0.05);栀豉悦心片各剂量组较空白对照组均无明显差异(P>0.05)。   1.1.2 对不动时间的影响   栀豉悦心片低剂量组及阿米替林组不动时间较空白对照组均显著减少(P<0.01);栀豉悦心片中、高剂量组较空白对照组亦明显减少(P<0.05)。   1.2 栀豉悦心片对小鼠强迫游泳的影响   1.2.1 对自主活动的影响   阿米替林组5分钟内爬格次数较空白对照组显著减少(P<0.01);栀豉悦心片各剂量组较空白对照组均无明显差异(P>0.05)。   1.2.2 对不动时间的影响   各给药组不动时间较空白对照组均显著减少(P<0.01)。   1.3 栀豉悦心片对强迫大鼠游泳的影响   1.3.1 对大鼠自主活动的影响   阿米替林组5分钟内爬格次数较空白对照组明显减少(P<0.05);栀豉悦心片各剂量组较空白对照组均无明显差异(P>0.05)。   1.3.2 对大鼠强迫游泳不动时间的影响   各给药组不动时间较空白对照组均显著减少(P<0.01)。   1.4 对利血平致小鼠眼睑下垂的影响   模型对照组眼睑下垂评分较空白对照组显著升高(P<0.01);栀豉悦心片各剂量组及阿米替林组较模型对照组小鼠均明显降低(P<0.01)。   1.5 对利血平致小鼠体温降低的影响   模型对照组体温较空白对照组明显降低(P<0.01);栀豉悦心片各剂量组及阿米替林组较模型对照组均显著升高(P<0.05或P<0.01)。   2.栀豉悦心片保护心脏作用的实验研究   2.1 对血清SOD、MDA含量的影响   模型对照组SOD水平较空白对照组显著降低(P<0.01);栀豉悦心片各剂量组及阿米替林组SOD水平较模型对照组均有明显升高(P<0.01)。模型对照组MDA含量较空白对照组明显升高(P<0.01);栀豉悦心片各剂量组及阿米替林组MDA含量较模型对照组均显著降低(P<0.05或P<0.01)。   2.2 对心肌SOD、MDA含量的影响   模型对照组SOD水平较空白对照组显著降低(P<0.01);栀豉悦心片各剂量组及阿米替林组SOD水平较模型对照组均有明显升高(P<0.05或P<0.01)。模型对照组MDA含量较空白对照组明显升高(P<0.01);栀豉悦心片各剂量组及阿米替林组MDA含量较模型对照组均显著降低(P<0.05或P<0.01)。   2.3 对血清CK、LDH活性的影响   模型对照组CK、LDH活性较空白对照组显著升高(P<0.01);栀豉悦心片各剂量组及阿米替林组CK、LDH活性较模型对照组均明显降低(P<0.05或P<0.01)。   结论:   1.栀豉悦心片可缩短小鼠悬尾实验及强迫游泳实验不动时间,缩短大鼠强迫游泳实验不动时间,并不影响开场实验中穿行格子数,证明其具有抗抑郁作用。   2.栀豉悦心片可拮抗利血平致小鼠眼睑下垂及体温降低,提示其抗抑郁作用可能与增加单胺递质有关。   3.栀豉悦心片可降低血清LDH及CK含量,升高血清及心肌SOD水平,降低血清及心肌MDA水平,提示其对心脏具有一定的保护作用,其机制可能与改善氧化应激有关。
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