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半纤维素生物降解后得到的低聚木糖是高附加值的功能性生理活性物质。近年来,在国际上掀起了一股功能性食品的研究生产热潮。而通过酶法降解木聚糖制备低聚木糖仍然是当前工业上应用较为广泛的方法。 本文对不同聚合度的底物合成木聚糖酶,木聚糖酶性能以及酶解条件对低聚木糖制备的影响进行了研究,并对木聚糖酶进行分级处理,为提高低聚木糖产品的得率和纯度,简化后续分离提纯工艺提供理论依据。 研究发现以平均聚合度较小的酶解渣为底物,可以产生较高活力的木聚糖酶,与平均聚合度相对较高的自制的粗木聚糖相比,木聚糖酶活力(75.65IU/mL)提高了33%。当维持低酶解渣底物浓度(7g/L)时,有助于提高木聚糖酶得率,且合成的木聚糖酶其酶解产物中低聚糖纯度和得率都较高。低聚糖占总糖的百分比为38.67%,酶解效率为42.63%。由于以酶解渣为底物产酶,同样可以诱导合成较高活力的木聚糖酶,且由于酶解渣是酶解反应的大量剩余物,其中仍含有75.41%的戊聚糖,考虑以之作为产酶底物,可以降低酶生产成本,通过将酶解渣循环利用,还可以大大提高酶生产原料的有效利用率,因而具有相当的经济可行性。 从木聚糖原料的有效利用率及产品中功能性成分—低聚糖所占的比例来看,当加入5%的酶量时,酶解4h为宜,此时,低聚糖得率最高,为13.49%,低聚糖与木糖的比值及低聚糖占总糖的百分比也较高,分别为0.8和44.53%。 通过在木聚糖酶液中添加(NH4)2SO4的方法可以去除一部分的β-木糖苷酶。实验表明,木聚糖酶经过(NH4)2SO4沉淀处理后,其酶解液中低聚糖与木糖的比值、低聚糖占总糖的百分比以及低聚糖得率比未处理的原酶有了大幅度的提高,且木糖含量显著下降。当加入5%的酶量,至酶解4h时,木糖含量仅为1.03g/L,低聚糖与木糖的比值以及低聚糖占总糖的百分比最高为8.55和89.53%,低聚糖得率也比原酶提高较多,为25.17%。 木聚糖酶液经超滤处理后,酶解效果较好,该处理方法可以有效降低木聚糖酶系统中的β-木糖苷酶活,从而大大地降低了低聚糖产品中木糖含量,提高了低聚糖得率和纯度。当加入酶量10%,酶解8h时,木糖得率也仅为1.91%,而低聚糖得率高达34%,当加入5%酶量,酶解8h后,低聚糖与木糖的比值以及低聚糖占总糖的百分比分别达到最高值,为25.63和96.25%。 木聚糖酶经过一系列分级处理后发现,组分B、C、D酶系结构较为合理,酶解产物中低聚糖得率和纯度都较高。其中尤以组分C较为优秀,其酶解产物中低聚糖得率和纯度都较高,酶解4h,低聚糖得率最高,为28.48%,低聚糖与木糖的比值和低聚糖占总糖的百分比也较高,分别为12.17和92.41%,从低聚糖生产用酶的角度来看,组分C较适合用于生产低聚糖。