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草坪草种的品种真实性鉴定是评定萆种质量的重要指标,是保证草坪安全生产和商业流通顺利进行的重要前提。传统的利用植物形态学特征鉴定的方法已被证明具有局限性,研究新的有效的品种鉴定技术已是草坪种业面临的首要任务。为此,本文采用等电聚焦电泳技术对适于西北地区的几种冷季型草坪草种进行了品种真实性鉴定研究,并使用电泳谱带分析软件ImageMaster 1D对草坪草种的过氧化物同工酶谱带进行了分析。通过多方验证,评定此技术作为草坪草种品种鉴定方法的可靠性。结果如下: 1、等电聚焦电泳技术鉴定品种真实性的关键是针对不同植物种类选用不同pH值范围的两性电解质(Ampholine)。通过大量实验,证明几类草坪草种在pH值为4-6范围的凝胶中过氧化物同工酶谱带更为清晰、易于鉴定。 2、在不同的生长期,植物体内同工酶的组分及含量产生变化。草坪草幼苗不同苗龄对电泳谱带的清晰程度产生影响,进而影响鉴定结果。实验证明,多年生黑麦草、高羊茅、紫羊茅及白三叶的最佳取材是发芽6-8天的幼苗,草地早熟禾的最佳取材是发芽10-12天的幼苗。 3、在实验过程中发现,这几种草坪草整株幼苗(除根)在统一加水25微升提取的条件下,酶提取液浓度有所差异,进而影响鉴定结果。经试验,早熟禾与白三叶在加水20微升提取酶液时,获得理想效果,其余种加水25微升提取效果较佳。 4、通过软件分析,对检测结果进行定性定量评定,充分表明了品种间的相关性及差异性。通过聚类分析测得各品种间遗传关系的远近程度。并 证明试验结果与植物分类学及室内种植结果基本一致。说明等电聚焦电泳 方法是鉴别草坪草品种的有效测定技术。