发光细菌法快速检测农产品主要污染物的平台构建及优化

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shen41941395
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中国是农产品生产与消费的主要大国。农产品的安全与否直接关系到食品质量问题,关乎到人民群众的生命健康问题。近年来,关于农产品残留的检测方法多种多样,其中主要以色谱为主的检测方法为普遍,但是其对于大批量的样品筛选需要周期长。发光细菌方法在正常的条件下在接受外来毒性物质,或者一些影响微生物正常生物的物质,其发光其强度会受到影响,并且在一定浓度内呈线性关系。本文主要利用两种发光细菌研究其对农产品中可能存在的污染物进行检测,并优化冻干粉快速检测方法。主要结果如下:(1)对两种发光细菌的基本生理特征行研究,明亮发光杆菌502在培养12h后达到对数生长末期,而青海弧菌Q67培养到15h达到对数生长期末期。通过制备高发光值的细菌冻干粉满足检测需要,选择了20℃发酵至对数生长期末期的特定生理状态的发光细菌进行冻干粉制作,并通过响应面优化的方面,确定冻干粉合适的保护剂组分为11.79%脱脂乳+5.52%蔗糖+1.75%谷氨酸钠。(2)利用细菌冻干粉对五种重金属进行量效曲线进行测定、线性区域拟合和EC50计算,对多种不同类型的抗生素进行筛选,发现符合快速检测要求盐酸金霉素、盐酸四环素、土霉素;对十六种农药进行筛选实验,抗菌类农药作用效果较其他显著,都在短时间内表现出很好的抑制作用有溴菌腈、甲霜锰锌、二氰蒽醌、异菌氟啶胺、乙酸异辛酯和氧吡甲禾灵。(3)利用二甲基亚砜(DMSO)胁迫,利用青海弧菌Q67对多种食品中可能存在的污染物进行毒性对比研究。DMSO浓度0.1%-1.0%之间在不影响发光细菌的同时可以有效的提高其对毒性物质作用毒性。对受试重金属汞、铜、镉、锌,其提高效率为43.28%-58.50%;四环类抗生素中盐酸金霉素、盐酸四环素、土霉素的提高效率在8.2%-11.6%之间;抗菌类农药二氰蒽醌、溴菌腈、甲霜灵、异菌氟腚胺的提高效率为10.49%-38.32%。
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