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猪瘟病毒（CSFV）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和边界病病毒（BDV）为黄病毒科瘟病毒属成员，其病毒结构、抗原性和遗传特性密切相关。CSFV囊膜结构（糖）蛋白E2（gp55）是诱导机体产生中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白。蛋白结构模型预测其N-末端区域暴露于病毒粒子表面，而C-末端短肽区延伸并穿越病毒囊膜。囊膜结构（糖）蛋白Erns／EO（gp48）具有RNA酶活性，在病毒增殖及中和病毒感染中发挥重要作用，是诱导机体产生保护性免疫应答的第二抗原蛋白。E2和Ens与细胞表面受体的相互作用介导猪瘟病毒对细胞的感染过程。 免疫过氧化物酶染色试验检测135株瘟病毒分离物结果表明：抗CSFV囊膜结构（糖）蛋白E2的单克隆抗体c24／10、a18、WH303及M1669，能识别目前已知的所有猪瘟毒株。而针对Ens的单克隆抗体1B5，b4-22和24／16均仅能识别部分猪瘟毒株，提示其对应的表位在所有猪瘟毒株不是共有的。上述所有单克隆抗体对CSFV感染均具有中和作用，与反刍动物瘟病毒不存在交叉反应。 本研究应用CSFV E2或Ens单克隆抗体c24／10、a18、WH303、M1669或1B5，b4-22 24／16，通过筛选M13噬菌体展示的12肽随机多肽文库，进行CSFV囊膜结构（糖）蛋白E2和Ens抗原表（拟）位定位；应用ELISA、阻断ELISA、免疫印迹分析、抗体中和活性抑制试验及免疫荧光抑制试验，鉴别不同表（拟）位对单克隆抗体的免疫反应性差异，对构成表位的关键性氨基酸残基进行鉴定；进行c24／10，a18，b4-22，24／16单克隆抗体轻链可变区编码基因核酸序列分析比较。结果发现： 1、c24／10、a18、WH303单克隆抗体针对同一在所有CSFV分离毒株中高度保守，而在其它瘟病毒（BVDV及BDV）相应区域差异显著的线性抗原表位。表位基序精确定位于E2结构蛋白的832-837位氨基酸（SPTTLR）（丝氨酸-脯氨酸-苏氨酸-苏氨酸-亮氨酸-精氨酸）。在此表位的氨基酸残基中，第一、二、三、五位氨基酸残基是与c24＼10，a18单抗隆抗体结合的必需氨基酸，也是构成此抗原表位的关键性氨基酸；尤其是第三位苏氨酸，当其改变为丝氨酸后，丧失与c24＼10，a18单抗隆抗体的结合能力，但仍可被WH303单克隆抗体识别；第六位精氨酸对表位与单克隆抗体的高亲合性结合有关。 2、鉴定获得WH303单克隆抗体识别的2个主要拟位：IfNnrT、AxIFPMTA及单抗M1669识别 3个主要拟位DxW、SLMPP、MLLH，并经ELISA和兔疫印迹检测获得证实，但在病毒EZ蛋白分子的氨基酸序列中未发现相同或相似的氨基酸序列。 3、研究发现分别针对IBS，b4－22和24／16单克隆抗体的三个主要抗原表 （拟）位基序以山b八 DKNR ( G和 A （T CxlteKN，分别定位于E”结构蛋白的351——357位、384－386位及322－323位、380－386位氨基酸。b4－22和24／16单克隆抗体针对的抗原表位基序有部分公共序列KN，识别E”‘蛋白中的相同 门以）抗原区，但其侧翼序列及在免疫印迹分析结果存在显著差异。b422单克隆抗体针对的是构象型表位。初步阐明IBS、24／16单克隆抗体抑制CSFV Em蛋白的RNA酶活性的作用机制。 4、单克隆抗体中和活性抑制试验表明：携带SPTxLR表位基序的噬菌体能特异性抑制单克隆抗体C24／10和WH303对病毒感染的中和活性，而IFhpr T、sIWVATA基序且不能。 5、单克隆抗体免疫荧光抑制试验发现：携带SPD九九FrNrR DKN( GorA (T CxyxKN表（拟）基序的噬菌体在免疫荧光试验中能阻断或部分阻断C24八，fos，b4E2和24人 单克隆抗体与病毒蛋白的结合反应。 6、自c24门，als，b4E2，24门 单抗杂交瘤细胞中获得鼠格G轻链可变区编码基因并进行序列分析比较表明：b422，24／16单克隆抗体对应的轻链可变区编码基因的核苦酸及氨基酸序列均存在差异，同源性分别为79％和63％，轻链上的三个互补决定区（CDR）或超变区氨基酸序列均存在显著差异；c24／10，a18单克隆抗体在轻链可变区编码基因氨基酸序列中，有6个氨基酸存在差异，其中5个氨基酸差异位于轻链可变区内的CDR区，CDRI存在四个氨基酸差异，CDRZ存在一个氨基酸差异，而CDR3完全相同。