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目的:探讨乳腺癌p53突变、bcl-2甲基化及两者异常表达与预后因素(肿瘤大小,淋巴结转移,增殖细胞核抗原PCNA,雌、孕激素受体ER、PR情况)的关系.方法:①设计bcl-2基因甲基化特异的PCR(Methylation specific PCR,MSP)引物,采用MSP方法检测54例乳腺癌bcl-2基因5端启动子CpG岛甲基化状态.②采用聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction and single-strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)方法检测45例乳腺癌p53基因5~8外显子点突变.③采用免疫组化S-P法检测54例乳腺癌bcl-2、p53、PCNA、ER、PR的表达.结果:①乳腺癌bcl-2和p53蛋白表达率分别为63.0﹪和40.7﹪.Bcl-2与p53表达之间呈显著负相关性(P<0.01).②Bcl-2蛋白表达率高与良好的预后因素(肿瘤小、PCNA标记指数LI低、ER+和PR+)显著相关(P<0.05或<0.01).P53蛋白表达率高与不良的预后因素(LI高、ER-和PR-)显著相关(P<0.05或<0.01).预后以bcl-2+/p53-者最佳,bcl-2<->/p53<+>者最差.③乳腺癌p53基因突变率为48.9﹪.P53基因突变与其蛋白表达呈显著正相关性(P<0.01).④p53基因突变率高及突变类型杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)与不良的预后因素(LI高、ER-和PR-)显著相关(P<0.05或<0.01).⑤乳腺癌bcl-2甲基化率为29.6﹪.Bcl-2甲基化与其蛋白表达之间呈显著负相关性(P<0.01).⑥Bcl-2甲基化率高与不良的预后因素(LI高、ER-和PR-)显著相关(P<0.01).结论:本研究MSP扩增和测序结果证实bcl-2基因CpG岛MSP引物之国内外首创设计的合理性.Bcl-2低表达、p53高表达(特别是bcl-2<->/p53<+>),p53基因突变(尤其是LOH),bcl-2甲基化,有可能成为乳腺癌预后不良的分子检测指标.