近年来由于蜂胶在医药学中的广泛应用而受到很高的关注,它具有抗氧化、抑菌、消炎、抗肿瘤等生物活性,而这些生物活性与其复杂的化学成分有密切关系,因此对其化学成分及生物活性的研究具有很高的科学价值。中国地域广大,跨越温带、亚热带、热带地区,各地蜂胶性状不同,而季节、地理位置对蜂胶品质的影响一直是蜂胶研究的重点,因此本实验研究了季节、地理位置对中国蜂胶醇提物的影响。本论文重点研究了中国不同季节的热带、亚热带和温带蜂胶醇提物(Ethanol Extraction of Propolis,以下简写为EEP)的化学成分、抗氧化活性及对9种常见菌的抑菌性,以期对中国蜂胶的影响因子做初步了解,为中国蜂胶的研究奠定基础。化学成分的研究采用分光光度法测定其色度、特定吸收率(E1%1cm)、总酚、总黄酮、黄酮-黄酮醇和黄烷酮的含量以及HPLC分析EEP的液相色谱图相似度。抗氧化活性的测定包括普鲁士兰法测定EEP总抗氧化能力；以1,1-二苯基-2-苦基肼(2,2-Diphenyl-l-picrylhydrazyl, DPPH)为清除对象,考查EEP清除自由基活性。抑菌性包括对3个革兰氏阳性菌：金黄色葡萄球菌(Staphilococcus aureus)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、产气杆菌(Clostridium perfringens);2个革兰氏阴性菌：大肠杆菌(Escherichia coli)、变形杆菌(proteusbacillus vulgaris);4个真菌：青霉(Penicillium glaucum)、曲霉(Aspergillus niger)、毛霉(Mucor racemosus)、根霉(Rhizopus nigricans)的抑菌圈以及最小抑菌浓度的研究。本论文还研究了中国不同地区29个蜂胶样本的EEP对9种常见菌的抑菌性,具体包括测定EEP对这些菌种的抑菌圈和最小抑菌浓度,不仅丰富了课题组的研究内容,也为较为全面的研究不同地区中国蜂胶提供了理论依据。研究结果如下。1.季节对中国EEP化学成分的影响较显著,总酚、总黄酮、黄酮-黄酮醇和黄烷酮的含量均是在7-8月达到峰值,而9月份各化学成分含量大多最低。其中不同月份间总酚和总黄酮含量差异极显著,总酚最大值为243.87±152.13 mg/g最小值为187.25±146.45 mg/g；总黄酮最大值为189.34±107.51 mg/g,最小值为122±81.02 mg/g；而黄酮-黄酮醇和黄烷酮的含量均值随月份变化不大。地理位置对中国EEP化学成分的影响显著,特别是热带地区EEP与亚热带和温带地区EEP总酚、总黄酮和黄酮-黄酮醇的含量差别巨大。其中总酚、总黄酮含量差异极显著,热带EEP的总酚和总黄酮含量是亚热带和温带地区EEP的1/6-1/4。不同地理位置EEP的E1%1cm值均显示与总黄酮含量相关性显著。2.通过测定中国不同季节不同地理位置EEP的总抗氧化能力和清除DPPH自由基活性发现,地理位置对中国EEP的抗氧化活性影响显著,不同地理位置EEP的抗氧化活性差异显著,热带EEP的总抗氧化能力最弱,在0.32～0.51之间,亚热带EEP的总抗氧化能力在1.33～1.48之间,温带EEP的总抗氧化能力最强,在2.28～2.62之间；地理位置对EEP清除DPPH自由基活性和对总抗氧化能力的影响趋势是一样的,热带EEP的AAI基本都小于0.5,其清除DPPH自由基活性最弱,亚热带EEP的AAI在1.87～2.47之间,其清除DPPH自由基活性强,温带EEP的AAI在4.61～6.29之间,其清除DPPH自由基活性非常强。说明中国蜂胶中温带蜂胶的抗氧化活性较好,亚热带蜂胶次之,而热带蜂胶的抗氧化活性最弱。季节对中国EEP抗氧化活性影响也显著,同时EEP的E1%1cm值与清除DPPH自由基活性和总酚或者总黄酮的含量相关性显著。3.通过测定中国不同季节不同地理位置EEP的抑菌圈和最小抑菌浓度来研究季节和地理位置对中国EEP抑菌性的影响。不同季节不同地理位置EEP对9个菌种的抑菌圈直径和最小抑菌浓度结果负相关显著,即抑菌圈越大,最小抑菌浓度越小,而代表的抑菌性也越大。同一地理位置不同季节EEP的不同月份抑菌圈直径进行显著性分析结果显示大多数并没有显著性差异,即抑菌性没有显著性差异,因此季节对中国EEP的抑菌性没有显著影响。地理位置对中国EEP对革兰氏阳性菌的抑菌性的影响显著,温带EEP抑菌性最强,亚热带EEP次之,而热带EEP最弱,这与EEP的化学成分含量的趋势相似,但是将抑菌性与EEP各主要化学成分和抗氧化活性进行相关性分析,并没有得到统一的规律。地理位置对中国EEP对革兰氏阴性菌和真菌的抑菌性的影响不显著,但是热带EEP对真菌的抑菌性明显好于其他菌种,与亚热带和温带EEP几乎没有区别。4.采用HPLC法对中国不同季节不同地理位置EEP的化学成分进行分析,色谱图的相似度结果表明热带EEP的化学成分与其他地区显著不同,而亚热带和温带EEP的化学成分种类类似,季节对热带EEP的化学成分的影响明显,但对其他地区EEP的化学成分影响不明显。5.为了解中国不同地区蜂胶的抑菌性,我们测定了中国不同地区29个EEP的抑菌圈和最小抑菌浓度,并根据中国的气候区域对蜂胶产地划分,结果显示中国不同地区EEP对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌都具有较好的抑菌性,但气候区域对EEP的抑菌性没有显著影响。EEP对革兰氏阳性菌的平均抑菌圈直径为9.88±1.47 mm,对革兰氏阴性菌的平均抑菌圈直径8.75±1.56 mm,对真菌的平均抑菌圈直径为10.01±0.65 mm,可见中国不同地区EEP对真菌的抑菌性最强,其次为革兰氏阳性菌,对革兰氏阴性菌的抑菌性最弱。在这9个菌种中,对变形杆菌的抑菌性最差,对根霉的抑菌性最好。