尼古丁对帕金森病大鼠异动症的作用及其机制研究

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【目的】左旋多巴诱发的异动症(L dopa induced dyskinesia,LID)是长期接受左旋多巴治疗的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者较为严重的并发症,而当今的治疗方法很有限。有实验研究表明非选择性乙酰胆碱受体(n ACh R)激动剂尼古丁可减轻左旋多巴诱发的异动症表现,但其确切机制仍不清楚。该实验通过检测尼古丁对异动症大鼠纹状体多巴胺D1受体(D1 dopamine receptor,D1R)介导的传导通路的影响,阐述尼古丁减轻左旋多巴诱发的异动症的作用机制。【方法】使用6羟基多巴胺(6 OHDA)毁损制备偏侧帕金森病大鼠模型,脑立体定向注射位点为右侧前脑内侧束。然后为建立稳定的异动症大鼠模型,给予制作成功的PD大鼠左旋多巴(10mg/kg)和苄丝肼(2.5mg/kg)腹腔注射,连续2周。然后给予尼古丁(0.1mg/kg,n=7)或生理盐水(1ml/kg,n=7),连续22天,期间继续给予左旋多巴治疗,且生理盐水、尼古丁在给予左旋多巴治疗10min前注射。在注射L dopa后14d及生理盐水或尼古丁治疗后1d、21d进行AIM评分,通过免疫组织化学法检测TH,western blot法检测ERK、p ERK和ΔFos B的表达水平,real time PCR法检测前强啡肽原和前脑啡肽原m RNA的表达水平,并通过透射电镜观察纹状体区神经突触变化。【结果】左旋多巴可诱发帕金森病大鼠产生异常不自主运动。急性尼古丁治疗对LID没有治疗作用(P>0.05),而长期尼古丁治疗可减轻大鼠的异动症表现(P<0.05),且不影响左旋多巴引起的对侧旋转行为(P>0.05)。Western blot法提示LID大鼠纹状体区p ERK1/2、ΔFos B的表达水平明显增多(P<0.05),经尼古丁治疗后,其表达量均明显下降(P<0.05)。RT PCR法提示LID大鼠纹状体区强啡肽原、脑啡肽原的m RNA表达水平均均较正常大鼠明显升高(P<0.05),经尼古丁治疗后,强啡肽原m RNA表达水平下降(P<0.05),而对脑啡肽原m RNA表达水平无明显影响(P>0.05)。透射电镜观察纹状体区突触,显示LID大鼠纹状体区突触后致密物质(postsynapse density,PSD)宽度增大,突触间隙变窄,经尼古丁治疗后减轻了上述突触结构的变化。【结论】尼古丁可通过调节多巴胺D1受体介导的传导通路中相关因子的表达,改善纹状体神经突触的结构,发挥减轻左旋多巴诱发的异动症作用。
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