淡紫拟青霉是防治根结线虫中最具有潜力的生防菌。目前,多采用固体发酵生产淡紫拟青霉孢子,但存在发酵周期较长,孢子保质期短等问题。依托液体发酵进行淡紫拟青霉产孢发酵和制剂化研究,将有助于探索高效的生产方法。此外,对淡紫拟青霉侵染线虫虫卵的转录组测序和差异表达分析,将有助于深入了解其对根结线虫的防治机理。本研究以淡紫拟青霉为研究对象,通过摇瓶发酵对淡紫拟青霉的发酵培养基进行了筛选;通过在发酵罐中发酵确定产孢条件和发酵罐发酵工艺;比较了不同载体对淡紫拟青霉孢子的保存效果的影响,探索孢子的保藏方法。通过高通量测序技术对淡紫拟青霉侵染线虫虫卵的转录组进行测序、组装及分析,探索淡紫拟青霉侵染线虫虫卵过程中其基因表达的变化,主要结果如下。(1)淡紫拟青霉发酵培养基的最佳C/N 比为16:1,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为黄豆粉,培养基配方为蔗糖56g/L,黄豆粉20 g/L,磷酸二氢钾2g/L,无水氯化钙0.4g/L,七水合硫酸镁0.3 g/L,六水合氯化钴0.037 g/L,七水合硫酸铁0.05 g/L,一水合硫酸锰0.016 g/L,七水合硫酸锌0.014 g/L。(2)低溶氧胁迫有助于淡紫拟青霉快速和高效产孢,发酵工艺为转速为500 r/min;通气比为0-24h 1:1(v/v:通气量:装液量)24-72h2:1(v/v);发酵温度为28℃;发酵压力为0 Mpa,孢子产量可达到20亿/mL。(3)采用分别过400目筛和500目筛的方法去除菌丝和3500 r/min离心可高效收集发酵液中的孢子,淡紫拟青霉孢子不能长期保藏,但在25℃下以玉米粉为载体密封保存孢子,可使保藏期进一步延长。(4)淡紫拟青霉侵染线虫虫卵转录组响应中,差异表达基因共鉴定出4699条,其中上调的为2750条,下调的为1949条基因。基于差异表达基因的GO功能富集,得到与生物学过程显著相关的有18个GO富集项,例如有机酸分解代谢过程、单体分解代谢过程和细胞氨基酸分解代谢过程,另外与分子功能显著相关的有10个GO富集项例如催化活性、辅酶结合、和氧化还原酶活性。此外,经KEGG富集还获得了差异表达基因相关生化代谢途径和信号转导途径中有显著响应的KEGG富集的途径有2条,分别为核糖体和缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸降解,而这些变化均与淡紫拟青霉侵染线虫虫卵的生物分解和合成相关。本研究探索了淡紫拟青霉对线虫虫卵的侵染的分子机制,对淡紫拟青霉液体发酵及其孢子制剂化的探索,将有利于淡紫拟青霉产业化应用的进一步深入开展。