【摘 要】
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目的:探讨转化生长因子-β(Transforming growth factor-β3,TGF-β3)对兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)成骨向分化的影响。方法:采用酶消化法将兔牙髓与颅骨体
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目的:探讨转化生长因子-β(Transforming growth factor-β3,TGF-β3)对兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)成骨向分化的影响。方法:采用酶消化法将兔牙髓与颅骨体外分离、培养并获得DPSCs与成骨细胞(osteoblast,OB),利用光学显微镜对细胞进行形态学观察;OB的鉴定,培养各细胞至第3代进行冻存;取DPSCs与OB分为3组:80ng/ml TGF-β3+DPSCs实验组、OB阳性对照及DPSCs空白对照组;1、3、5、7d后采用碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)试剂盒检测各组细胞内ALP活性情况;1、3、5、7d后采用细胞免疫化学法检测各组成骨标记物Runx-2的表达情况;7、14d采用茜素红染色观察各组矿化结节的表达情况;1、3、5、7d通过Western-blot方法检测各组成骨特异性标志物相关转录因子2(Related transcription factor 2,Runx-2)及TGF-β3蛋白表达情况。结果:兔OB形态多呈短梭形或成纤维样细胞形态,突触少而丰满,而DPSCs大多呈长梭形细胞形态,突触较多;OB鉴定阳性;7d时阳性组与实验组细胞内ALP活性比较无统计学意义(P>0.05);实验组与OB组Runx-2免疫组化及茜素红染色阳性;Western-blot各时间点空白组与两组比较Runx-2和TGF-β3相对蛋白表达量均有统计学意义(P<0.05),7d实验组Runx-2和TGF-β3相对蛋白表达量均高于对照组(P<0.01)。结论:TGF-β3一定程度上促进DPSCs成骨向分化。
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