北五味子中联苯环辛二烯类总木脂素提取工艺及其肝损伤保护活性的研究

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联苯环辛二烯类木脂素是一类富含于北五味子中的有效成分,虽然几十年来,研究者们对其研究已经较为全面和深入。然而,目前北五味子质量控制的主要方法仍然是指纹图谱,未能合理的把其主要有效成分与药理活性结合起来,这对解释其生物功能仍然不够合理、科学。本论文主要目的是研究北五味子中的有效成分联苯环辛二烯类总木脂素的主要物质组群和保肝作用之间的有效关系,旨在预测总木脂素中的主要活性成分及活性成分之间的最佳配伍,有望为北五味子在保肝方面的进一步发展提供新的研究策略。同时,本研究还优化了北五味子中联苯环辛二烯类木脂素的提取、富集工艺,并对此类木脂素中的主要单体化合物进行分离和鉴定,为谱效关系的分析提供物质基础。因此,本论文主要从以下六个方面对研究工作进行了汇报。本论文在前言部分,主要综述了与本实验相关的研究进展及本论文课题的立题依据、研究目的和意义。实验内容分作五部分分别介绍,首先对北五味子中联苯环辛二烯类总木脂素提取及富集工艺进行了优化,确定了最佳的工艺为:用90%乙醇加热回流提取2次,每次4 h,料液比为7∶1;用6倍量的乙酸乙酯萃取5次;用AB-8大孔树脂按照1∶10拌样,依次用6倍量的蒸馏水和20倍量的95%的乙醇洗脱样品,收集95%段的样品得到联苯环辛二烯类总木脂素。其次,通过多种天然药物化学中常用的色谱分离方法及波谱解析技术共分离得到12个联苯环辛二烯类木脂素并鉴定了它们的结构。再次,通过HPLC分析技术建立了北五味子联苯环辛二烯类总木脂素的特征图谱,从中共分离得到了35个色谱峰,并指认了其中的17个共有峰。进而,利用人正常的肝细胞HL-7702细胞株,借助CCl4诱导肝损伤模型,采用MTT法筛选了11批北五味子联苯环辛二烯类总木脂素的肝损伤保护活性。最后,在上述化学和生物活性筛选的基础上通过Mini tab 16.0数据分析软件对北五味子联苯环辛二烯类总木脂素可能的谱效关系进行了分析,结果显示五味子乙素、五味子酯甲、五味子甲素等对保肝活性具有显著的促进作用。本论文对北五味子中联苯环辛二烯类木脂素的提取、富集、分离、分析及生物活性等多个方面进行了全面的研究,为中药北五味子质量控制标准的完善和保肝方面的药物及保健品的研发提供了科学依据和新的研究策略。
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