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目的:选取五倍子、白芷和白芨三味中药的主要成份没食子酸、厚朴酚及白芨多糖三者配伍制成复方中药制剂,作用于浮游及生物膜状态下的感染根管内常见菌,观察其抗菌作用,探讨复方中药制剂作为根管封闭剂中抗菌药物的可行性。
方法:实验分为二个部分进行1、对浮游状态下感染根管内常见菌的抗菌作用:选择感染根管内3种常见菌:黏性放线菌(Av)、粪肠球菌(Ef)、具核梭杆菌(Fn)作为实验菌株,并按照中药组方原则选取没食子酸、厚朴酚、白芨多糖三者的粉剂溶解于二甲基亚砜(DMSO)制成复方中药制剂,采用液体二倍稀释法,测定复方中药制剂对上述标准菌株浮游状态细菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度;同时设阳性对照和阴性对照组。
2、对生物膜状态下感染根管内常见菌的抗菌作用:首先,将上述三种实验菌培养成单菌生物膜及3种细菌的混合生物膜;然后,把复方中药制剂作用于已形成的生物膜,利用激光共聚焦显微镜观察,定量研究各生物膜的厚度变化和生物膜各层的细菌活性;同时,设阳性对照、阴性对照以及空白对照组;结果采用SAS6.12软件包进行统计。
结果:
1、通过液体二倍稀释法测得了复方中药制剂对上述三种实验菌株的MIC和MBC值,同时测得氧化锌溶液对Av以及Fn的MIC和MBC值,DMSO对Fn的MIC和MBC值。但未测得氧化锌溶液对Ef的MIC和MBC值,也未测得DMSO对Av和Ef的MIC和MBC值。
2、观察Av、Ef、Fn形成的单菌生物膜及混合生物膜,其中间层的细菌密度最高,明确了生物膜内的细菌主要集中在中间层,但各层的活菌百分比无显著性差异。在使用中药制剂后,各单菌生物膜及混合生物膜的厚度均有所降低,但降低程度与阳性对照组和阴性对照组均无显著性差异;同时,Fn单菌生物膜和三菌的混合生物膜各层的活菌百分比均有显著性改变,而对于兼性厌氧菌Av和Ef,用药前后其生物膜各层的活菌百分比无显著性差异。
结论:生物膜内的细菌主要集中在中间层,内、外层细菌较稀疏,各层的活菌百分比无显著性差异;由没食子酸、厚朴酚、白芨多糖组成的复方中药制剂相较于氧化锌具有较好的抗菌作用,作为根管封闭剂中的抗菌药物具有一定的应用前景。