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目的：采用乙醇对药材枳楔子(SemenHoveniae)活性成份进行提取，测定其所含的总黄酮及槲皮素含量，并研究枳棋子提取物(SemenHoveniaeextract，SHE)抗氧化损伤的作用及其抗疲劳作用，以期为进一步开发枳棋子的药用价值提供理论依据。
方法：(1)用75％的乙醇对枳棋子药材进行提取，采用比色法，以芦丁为对照品，测定提取物中的总黄酮含量，选用HPLC法对提取物的槲皮素含量进行测定。(2)NIH小鼠分为6组：高剂量组、中剂量组、低剂量组、维生素E组、模型组、空白对照组。除空白对照组外，其余各组小鼠颈背部皮下注射D—半乳糖(D—Gal，100mg/kg)造成小鼠氧化损伤模型，药物用1％的羧甲基纤维素(CMC)配制，给药组分别灌胃给予相应药物，模型组、空白对照组以1％CMC灌胃，连续给药45天后进行实验，以小鼠水迷宫测定衰老小鼠的学习记忆能力；比色法测定小鼠肝脏及脑组织中超氧歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活力及丙二醛(MDA)含量，蛋白含量测定用考马斯亮蓝法。采用H2O2(0.1mmol/L)作用18h造成PC12细胞氧化损伤模型，细胞分为空白组、溶媒组、模型组、药物高、中、低剂量组(400μg/ml、200μg/ml、100μg/ml)、单纯药物损伤组(400μg/ml)，预先给予各浓度药物作用2h后，加入H2O2作用18h，显微镜下观察PC12细胞形态改变，MTT法测定细胞活力，LDH法检测细胞膜的损伤情况。(3)雄性NIH小鼠随机分为5组：空白对照组、阳性对照组(红景天)及低、中、高(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)3个剂量给药组，连续给药14d后，采用负重游泳实验，观察小鼠耐力；小鼠游泳一定时间后采血检测血清尿素氮、血乳酸；取肝脏检测肝糖原，考察枳棋子抗疲劳的作用。
结果：(1)总黄酮测定的标准曲线为A=-0.040+0.015×C，r=0.999，线性范围为10μg/ml～50μg/ml，总黄酮含量为(28.67±2.30)％。槲皮素测定的标准曲线为A=-466.864+48.708×C，r=0.999，线性范围66μg/ml～330μg/ml，槲皮素含量为9.067mg/g。(2)水迷宫实验中，模型组小鼠水迷宫测试的潜伏期显著延长(72.9±42.9s)，错误次数显著增加(7.6±3.9)，肝、脑SOD活力(56.568±22.469U/mgprot、105.797±26.141U/mgprot)、GSH—Px(62.347±26.290U/mgprot、51.300±11.646U/mgprot)明显降低，而MDA的含量(1.577±0.418nmol/mg、4.833±0.758nmol/mg)明显升高。三个SHE剂量组的小鼠，分别对上述变化有不同程度的改善作用，低、中、高剂量组的潜伏期分别为37.7±29.5s、44.9±26.4s、42.2±23.0s；错误次数分别为：3.4±1.8、4.6±2.4、4.3±2.3；肝脏SOD活力分别为106.223±46.648U/mgprot、128.475±35.914U/mgprot、143.878±63.137U/mgprot；大脑SOD活力分别为172.340±54.433U/mgprot、175.879±69.783U/mgprot、197.967±69.101U/mgprot；肝脏GSH—Px活力分别为95.241±34.109U/mgprot、123.934±32.109U/mgprot、134.555±39.538U/mgprot；大脑GSH—Px活力分别为83.118±22.137U/mgprot、91.358±39.703U/mgprot、94.537±49.241U/mgprot；肝脏MDA含量分别为1.325±0.565nmol/mg、1.158±0.356nmol/mg、1.092±0.369nmol/mg；大脑MDA含量分别为3.262±0.752nmol/mg、2.829±0.927nmol/mg、2.066±0.637nmol/mg。细胞实验显示，枳棋子提取物可显著对抗H2O2所致的氧化损伤，模型组细胞MTT值和细胞外液的LDH值分别为0.25±0.072和1326.855±290.319U/L，与空白对照组比较，有显著性差异(P<0.01)，给予三个浓度药物干预后，MTT值分别为0.381±0.063、0.455±0.044、0.618±0.078；细胞外液LDH活力分别为931.095±96.964U/L、777.385±61.339U/L、636.042±217.211U/L。(3)在负重游泳实验中，三个SHE剂量组大鼠的游泳时间由空白对照组的464.700±285.206秒增加到777.000±224.939s、850.000±312.763s、949.300±574.591s；空白组小鼠运动后尿素氮水平为9.015±0.899mmol/L、三个SHE剂量组小鼠运动后尿素氮水平为8.357±0.698mmol/L、8.286±0.818mmol/L、7.951±0.772mmol/L；空白对照组小鼠的肝糖原含量为13.524±3.140mg/g、三个SHE剂量组小鼠的肝糖原含量为16.964±1.819mg/g、17.251±3.938mg/g、19.224±4.477mg/g。空白组小鼠和各剂量组小鼠的血乳酸水平未见有显著差异。
结论：SHE中总黄酮含量为(28.67±2.30)％，槲皮素含量为9.067mg/g，SHE可显著改善氧化损伤模型小鼠的学习记忆能力，保护H2O2氧化损伤的PC12细胞，其作用机制可能与其可以提高抗氧化酶的活力，促进自由基的清除有关；同时，可以显著延长小鼠负重游泳的时间，降低运动后体内的尿素氮水平，增加肝糖原含量。表明，SHE具有显著的对氧化损伤的保护作用及抗疲劳作用。