利用胚挽救技术培育无核葡萄新种质

来源 :河南科技大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zzc2001
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以假单性结实型无核葡萄品种作母本,以欧洲葡萄(V. vinifera L.)与中国野生山葡萄杂种 F1优株、欧亚种无核品种作父本杂交,设计9个杂交组合,利用胚挽救技术进行无核葡萄新种质的创制,并对影响胚挽救效率的重要因素进行了研究。取得的主要结果为:  1.共对‘秦秀’ב木星’、‘波尔莱特’ב00-1-5’、‘火焰无核’ב00-1-5’、‘秦红 10号’ב00-1-5’、‘秦红2号’ב木星’、‘克瑞森无核’ב00-1-10’、‘红宝石无核’ב00-1-5’、‘木星’ב苏-67’以及‘火焰无核’ב木星’9 个组合 25000 个葡萄花蕾进行杂交,取回 4075 个杂交幼果,利用胚挽救技术共获得 6619 个胚珠、剥取 874 个杂种胚,获得461株幼苗。  2.对‘秦秀’ב木星’幼果分别在花后36、38、40、42和44d采样进行胚挽救。以MM3+1.5 mg/L IAA+0.5 mg/L GA3+1 mmol/L丝氨酸+0.5 g/L 水解酪蛋白固-液双相培养基为种胚发育培养基,以 WPM+0.2 mg/L 6-BA 固体培养基为萌发培养基。结果表明,‘秦秀’在花后42d取样时胚的发育率和萌发率最高。  3.在花前2周,分别对‘火焰无核’ב00-1-5’、 ‘秦红10号’ב00-1-5’、 ‘红宝石无核’ב00-1-5’和‘秦红2号’ב木星’4个组合的母本喷施0、10、30和50 mg/L 6-BA 溶液,按照各母本最佳取样时期取样,将胚珠接种在胚发育固-液双相培养基MM3+1.5 mg/L IAA+0.5 mg/L GA3+1 mmol/L 丝氨酸+0.5 g/L 水解酪蛋白上, 8 周后剥取裸胚,接种在 WPM+0.2 mg/L 6-BA 固体培养基上培养。结果表明,当6-BA浓度为30 mg/L时,‘火焰无核’ב00-1-5’的胚发育率最高;而其他3组合在50 mg/L时胚发育率最高。  4.杂交亲本对胚挽救效率影响较大,‘秦红2号’、‘波尔莱特’、‘红宝石无核’、‘秦红 10 号’作母本时,得到的杂种株系率最高;其次是‘木星’和‘火焰无核’;而‘克瑞森无核’和‘秦秀’胚挽救效果不佳,不宜选作母本。当母本同为‘火焰无核’时,‘木星’比‘00-1-5’更适于作杂交父本。  5. 将‘红宝石无核’ב00-1-5’ 组合的胚珠接种在MM3添加0.5 mg/L GA3、1.5 mg/L IAA 和 0.5 mg/L 6-BA 培养基上,幼胚在 WPM+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA培养基上,杂种胚的萌发率可达86.30%。  6.分别利用葡萄无核基因分子标记 SCF27-2000 对‘红宝石无核’ב00-1-5’和‘秦红2号’ב木星’组合的153、72个杂种株系进行早期无核性状鉴定,分别标记出40、18个株系拥有无核基因分子标记,无核率分别为26.41%和25%。
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